HLA ellenes antitestek szűrése és nyomonkövetése

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
„Esélyteremtés és értékalakulás” Konferencia Megyeháza Kaposvár, 2009
Advertisements

Hotel Eger Park Konferenciaközpont október
Az Eurotransplant rendszere, működése és a csatlakozás jelentősége
Aktualitások a szervátültetésben 2012
Szervezetfejlesztési Program
2010. Augusztus 16. és Augusztus 17. hajnala.
TÁMOP-5.5.5/08/1 A diszkrimináció elleni küzdelem – a társadalmi szemléletformálás és hatósági munka erősítése Társadalmi szemléletformálás – a komplex.
1. Konzorciumi Partnerek •Magyar Szakszervezetek Országos Szövetsége (MSZOSZ) •Magyar Iparszövetség (OKISZ) •Ipartestületek Országos Szövetsége (IPOSZ)
dr. BALLA TÜNDE, dr. BORSICS KÁLMÁN
Szervezetfejlesztési Program
ENVI-ART Környezetvédelmi Tanácsadó és Szolgáltató Kft.
A kormányzat szerepvállalása a kibervédelemben Dr. Rétvári Bence államtitkár Változó környezet, változó biztonság - Kiberfenyegetések kihívásai napjainkban.
Agyhalál, szervdonáció és szervátültetés
Antiparazitikumok jelene és jövője a kisállatpraxisban MSDay Budapest, április 10. Dr. Ózsvári László.
PannonRIS – Folyami Információs Szolgáltatások Magyarországon
„Környezetvédelmi vállalkozói inkubátorház létesítése Rákospalotán” KMOP-1.5.3/A PROJEKTINDÍTÓ RENDEZVÉNY január
Egy kis séta, hidegben, Debrecenben és Hajdúszoboszlón Fényképezte: Szedő Iván.
TNS Hoffmann 1 Rádiós hallgatottsági eredmények május – július – a RAME tagjaira vonatkozó eredmények.
Belügyminisztérium Belügyminisztérium dr. Bitay Márton Önkormányzati Stratégiai Főosztályvezető Magyarország helyi önkormányzatairól szóló évi CLXXXIX.
Gubicza Zsanett képzési referens Budapest,
Csanády András (KIM-KFSTF)
Dr. Bujdosó András Imre főosztályvezető
Transzplantációs immunológia
6. Előadás Merevítő rendszerek típusok, szerepük a tervezésben
B ÉRES G YÖRGY Gazdasági főigazgató Az egészségügy háttérszolgáltatásának és egyéb népgazdasági ágazatoknak a kapcsolata március 31.
FÜGGETLEN KÖZLEKEDÉSBIZTONSÁGI
A 2-es típusú diabetes kezelése –
Vesetranszplantációs várólistán lévő betegek cardiovascularis állapota
Semmelweis Egyetem, Transzplantációs és Sebészeti Klinika, Budapest
Hyperuricaemia és hypertonia Hypertonia Központ Óbuda, Budapest
A dializáló nővér szerepe a transzplantációs várólistára
Eurotranszplant – újdonságok a transzplantációban
11 Fiktív példa az ELISA, Western blot és áramlásos citometria alkalmazására a humán diagnosztikában.
Egészségügyért Felelős Államtitkárság Az alapellátás megerősítésének helyzetértékelése Dr. Beneda Attila január 17.
Idősor előrejelzés Önálló laboratórium 2. Kollár Péter Attila ICG36F Konzulens: Dr. Pataki Béla.
A projekt az Európai Unió támogatásával, az Európai Szociális Alap társfinanszírozásával valósul meg Nemzetközi és határ menti együttműködések támogatása.
Egészségügyi szakdolgozók tűszúrásos baleseteinek hazai alakulása
Eurobarometer, %-os jövedelemnövekedés 2,1%-os sportkiadás- növekedés.
KETTŐ AZ EGYBEN: MÚZEUMPEDAGÓGIAI KÉPZÉS ÉS GYAKORLATI HELY KIALAKÍTÁSA A SZEGEDI TUDOMÁNYEGYETEM JUHÁSZ GYULA PEDAGÓGIAI KARÁN Dr. Viskolcz Noémi Szegedi.
Magyarország közlekedésbiztonsága első négy hónapjában.
ASSET-Road projekt Stautz János Clarity Consulting.
TÁMOP-5.5.5/08/1 A diszkrimináció elleni küzdelem – a társadalmi szemléletformálás és hatósági munka erősítése Az országos egyenlőbánásmód-referensi hálózat.
MIKROELEKTRONIKA, VIEEA306
TAMOP-2.2.3/B-09/ Nyomonkövetési munkacsoport.
1. NYÍREGYHÁZA – Örökösföld Közterület rehabilitáció.
TÁMOP 5.5.1/A-10/ “Jó pályán! Jó gyakorlatok továbbfejlesztése és alkalmazása a munkaerő-piaci integrációért és esélyegyenlőségért” Foglalkoztatási.
TÁMOP 5.5.1/A-10/ “Jó pályán! Jó gyakorlatok továbbfejlesztése és alkalmazása a munkaerő-piaci integrációért és esélyegyenlőségért” Foglalkoztatási.
TÁMOP 5.5.1/A-10/ “Jó pályán! Jó gyakorlatok továbbfejlesztése és alkalmazása a munkaerő-piaci integrációért és esélyegyenlőségért” Foglalkoztatási.
LOT 2 – LOT 3 Csepeli hálózatfejlesztés I. és II.
WP4.2. „Measurement Plan“ Barta Zoltán
Átlag napi elérés a 15 évesek és idősebbek körében országos Forrás: Ipsos-GFK ‘Rádiós Közönségmérés’, április, ReachN Mintaelemszám: 2000 fő, hibahatár.
A évi népszámlálás és a külföldiek integrációja Gödri Irén Transznacionalizmus és integráció c. konferencia Budapest, május 17.
Beszámoló a Fővárosi Önkormányzati Rendészeti Igazgatóság tevékenységéről (2010. október – május) 1/13.
Projekt eredményeinek disszeminációja – Általános projektbemutató ÁROP- 1.A „Szervezetfejlesztés a konvergencia régióban lévő önkormányzatok számára”
Dr. Matyovszky Balázs magánállatorvos
Rádióadók hallgatottsága március Az Ipsos-GFK rádiós közönségmérésének adatai.
Az edukálás szerepe a dializált betegek együttműködésének javításában
1 Gyorsul a gazdaság növekedése. 2 Nő a beruházás.
FEMIP „Minőségfejlesztés a felsőoktatásban” TÁMOP / Bángi-Magyar Attila szakmai vezető OFI Szakmai Napok december 7.
Dr. Vojnisek Zsuzsanna, Dr. Szőnyi László, Dr. Dezsőfi Antal
Eurotransplant csatlakozás: reális lehetőség?
NAGYGÉPES ESEMÉNYEK KBSZ SZAKMAI NAPOK - REPÜLÉS
TIT Öveges József Ismeretterjesztő és Szakképző Egyesület
XIII. Országos Felsőoktatási Környezettudományi Diákkonferencia
Számítástechnika az UVATERV-ben
Országos szakképzési tanévnyitó igazgatói értekezlet 2010/2011. tanév Tájékoztató a felnőttképzési akkreditációról Torma Gabriella FAT titkárságvezető.
Eurotransplant – az új feladat
Tumorimmunitás, transzplantáció Falus András. protoonkogének tumor szuppresszor gének egészséges állapot.
Érettségi
TRANSZPLANTÁCIÓS IMMUNOLÓGIA I.
Előadás másolata:

HLA ellenes antitestek szűrése és nyomonkövetése Dr. Tordai Attila Transzplantációs Immungenetikai Laboratórium vezetője Országos Vérellátó Szolgálat, Budapest

HLA-ellenes antitestek szűrése és nyomon követése Tordai Attila Országos Vérellátó Szolgálat Transzplantációs Immungenetikai Laboratórium XVIII. Debreceni Nephrológiai Napok, 2013. 06. 01.

Tartalomjegyzék A HLA-labor lehetőségei a szervtúlélés javításában: Logisztika (CIT-csökkentés); A HLA-egyezés javítása (HLA-tipizálás); HLA-ellenes antitest szűrés, azonosítás; Transzplantáció modellezés (keresztpróba); A kilökődés immunológiai hátterének vizsgálata; Változások az Eurotransplant-csatlakozás után. 3

A hideg ischémiás idő csökkentése a sürgősségi kivizsgálás átszervezésével

A sürgősségi tevékenységek összehasonlító folyamatábrája

A hideg ischaemiás idők (CIT) összehasonlítása régi rendszer utolsó 10 éve (2000.jan.1-2010.okt.31.) (régió: B, D, S, P) utolsó 10 hónapja (2010.jan.1-2010.okt.31.) új rendszer első 10 hónapja (2011. jan.1-2011. okt.31.) átlag (óra) 18,7 ± 3,9 16,5 ± 3,5 12,4 ± 3,2 esetszám (db) 1673 114 91 p<0,001 p<0,001 CIT2 régi rendszer utolsó 10 éve (2000.jan.1-2010.okt.31.) (régió: B, D, S, P) utolsó 10 hónapja (2010.jan.1-2010.okt.31.) új rendszer első 10 hónapja (2011. jan.1-2011. okt.31.) átlag (óra) 21,7 ± 4,0 19,8 ± 3,4 16,0 ± 3,8 esetszám (db) 1155 95 81 p<0,001 p<0,001

HLA-ellenes antitest szűrés, azonosítás

Miért foglalkozunk a HLA-ellenes antitestekkel? TX előtt a preformált (vetélés/szülés, transzfúzió, korábbi TX) antitestek hiperakut rejekciót okozhatnak; TX után antiest-mediált rejekciót okozhatnak. MEGELŐZÉS NYOMON KÖVETÉS

Az antitest-kimutatás evolúciója CDC ELISA Flow/Luminex multi-Ag beads Virtual XM FC Lymphocytes AHG-CDC Flow/Luminex/ELISA single-Ag and Donor-specific 9

Komplement-dependens citotoxicitás (CDC) Terasaki & McLelland: mikro-lymphocyto-toxicitás tipizálásra: 1964:HLA-A,-B,-C 1977:HLA-DR 1984:HLA-DQ 2013:múzeumban. Elve: Sejtpermeabilizáció következik be, ha a HLA sejtfelszíni antigénhez egy arra specifikus, komplement aktivációra képes HLA-ellenes antitest kötődik. A pozitivitás viabilitási festékkel jeleníthető meg. Terasaki-tálca: 1 µl szérum!!!! Alkalmas: (i) antigén-meghatározás (tipizálás); (ii) antitest-kimutatás; (iii) keresztpróba.

A CDC-teszt mikroszkópos képe Negatív Pozitív

HLA-ellenes antitest szűrés CDC-vel – panel reaktív antitestek (PRA) A beteg HLA ellenes antitest-előfordulási gyakorisága %-ban kerül meghatározásra ismert HLA típusú paneltagok limfocitáival (szűrősejtek) szemben. pozitív negatív PRA = 92% A számszerű eredményt befolyásolja, hogy milyen gyakori antigén ellen termelődik antitest.

LUMINEX xMAP technológia Áramlási citometria + szendvics ELISA LUMINEX xMAP technológia A két festék (vörös és infravörös) eltérő arányú keveréke 100-féle gyöngytípust eredményez egyedi spektrális kóddal. Egy reakcióban egyszerre elméletileg 100 féle analit is vizsgálható.

HLA-ellenes antitestek kimutatása szolid fázisú (LUMINEX) technikával Recipiens savó; ismert HLA- antigéneket tartalmazó gyöngyök; Fluoreszcens festékkel konjugált másodlagos antitest (anti-humán IgG).

HLA-ellenes antitest szűrés (LABScreen mix)

HLA-ellenes antitestek azonosítása (single antigen) LABScreen Single Antigen HLA I. osztály

HLA-ellenes antitestek azonosítása (single antigen) LABScreen Single Antigen HLA II. osztály Donor: DR9,14 DR52,53 DQ9,7

Transzplantáció modellezés (keresztpróba)

Keresztpróba (cross-match, XM) Kérdés: van-e a recipiens szérumban a donor sejtekre specifikus antitest. Technika: CDC – komplement aktiváló antitestek; FACS (áramlási citométer) – nemcsak komplement aktiváló antitestek, de érzékenyebb. Célsejtek: perifériás vér mononukleáris sejtek vagy lép/ny.cs. sejtek (cadaver).

A kilökődés immunológiai hátterének vizsgálata

Tx előtt Tx után Donor-specifikus antitest (DSA) Recipiens antitest-profil SA módszerrel + Donor lehető legrészletesebb (6 lokusz) HLA-tipizálása Tx előtt Hiperimmunizált betegeknél tolerálható antigének előzetes azonosítsa (acceptable mismatch, AM program); Már transzplantált betegnél DSA nem mindig jelenik meg valamennyi donor-antigénnel szemben – retranszplantáció esélyének növelése; Élő donoros átültetésnél megfelelő donor kiválasztás – „paired donation”. A DSA, ill. nem DSA anti-HLA antitestek elkülönítése + mennyiségi/aviditási információ (átlagos fluoreszcencia intenzitás – MFI); Ha új DSA jelenik meg, vagy nő a DSA-MFI – rossz prognózis; Ha DSA eltűnik vagy csökken a DSA-MFI – eredményes terápia. Tx után 21

A pre-TX donor specifikus antitestek hatása a graft-túlélésre Lefaucheur 2010. J Am Soc Nephrol 22

Antitest-mediált rejekció (AMR) Lefaucheur 2010. J Am Soc Nephrol AMR nélküli alcsoport n=370 Lefaucheur 2010. J Am Soc Nephrol 23

A single antigen (SA)-vizsgálat lehetőségei Nagy immunológiai kockázatú betegeknél; Deszenzitizációt követően az antitest újratermelődés kimutatására; Immunológiai rejekció gyanújakor; Rejekció elleni terápia nyomon követésére. Hátrányok Túlzott érzékenység – esetlegesen klinikailag nem jelentős antitestek; A nem komplement-aktiváló antitesteket is kimutatja (fagyasztva tárolt cadaver sejtekkel utolagos XM-mel eldönthető; A reagens (gyöngyök) antigén-készlete nem tükrözi a helyi populációra jellemző HLA-eloszlást; Nem ismert a gyöngyökhoz kötött antigének sűrűsége és konformációja; Költséges. 24

Változások az Eurotransplant-csatlakozás után 25

A cadaver vese TX program sajátosságai ET-tagként Speciális programok: (i) gyermek; (ii) acceptable mismatch (AM); (iii) sürgősségi; EFI-akkreditált HLA-labor (jelenleg Bp, később Debrecen); Részvétel az ET szisztematikus mintacsere programjaiban; A recipiens adatokat a TX-centrumok, a HLA-adatokat pedig a HLA-labor rögzíti az ENIS-programba; Szerv-allokáció az egységes ENIS-program (Leiden) által; Szérumgyűjtés a listán levő betegektől 3 havonként, immunizált betegek mintáinak küldése 30 ET-laborba; Törekvés az antitest-profil részletes előzetes megismerésére – virtuális keresztpróba; Új vesebetegek: kétszeri mintaküldés 2 hét időközzel, folyamatos listára kerülés.