Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról
Mikroszkópok hagyományos optikai mikroszkóp konfokális mikroszkóp fluoreszcencia-élettartam mérése Endoszkópok, távcsövek Fotoelektron-sokszorozó – sokcsatornás síkdetektor (photomultiplier)(microchannelplate detector) kapuzható képerősítő (gated image intesifier) Streak camera
Milyen információt szolgáltathat a lumineszcencia? Intenzitás-eloszlás Spektrális eloszlás Időbeli eloszlás, élettartam- eloszlás
Bazsalikom levél, szekréciós mirigy az epidermisz felszínén (a kék-zöld fluoreszcencia a sejtfal anyagok pl., ferulasav, viaszok, illetve a flavonoidok fluoreszcenciaja) exc = 351 nm emi = nm kék nm zöld > 650 nm vörös 100 m
Sorghum levél felszine: exc = 351 nm exc = 351 nm emi = nm kék emi = nm kék nm zöld nm zöld > 650 nm vörös > 650 nm vörös A 100 m AB D C BD C 32 m Fluoreszcencia réteg felvételek cirok levélen A felszínen a sejtfal alkotók kék-zöld fluoreszcenciája dominál, beljebb a fotoszintetizáló sejtek klorofilljáé.
exc = 351, 364nm, Ar laser 505 nm < em <550 nm em > 650 nm DanePy infiltrált spenót levél, a felszíntől 15 m mélységben (mezofill sejtek)
Összetett kép (zöld + vörös fluoreszcencia) és intenzitás eloszlás a jelzett egyenes mentén
exc = 351, 364nm 505 nm < em <550 nm em > 650 nm DanePy infiltrált spenót levél, fotoinhibíciós kezelés 45 min után: a levél fotoszintetikus aktivitásának kb. 2/3-a elvész, ha proteináz inhibitor jelenlében végezzük el a kísérletet, akkor kb 15% D1 protein károsodás detektálható jelentős pigment bleach (total pigment) és lipid peroxidáció még nincs 0’45’30’15’
Fluorescence lifetime imaging
A több-fotonos gerjesztés alapelve
Hőmérséklet-mérés foszforeszcencia- élettartam alapján
Fotoelektronsokszorozók
Fotoelektronsokszorozó működési elve
Microchannel plate detector működési elve
Kapuzható képerősítő működési elve
Példa a kapuzott képerősítő használatára
Streak camera működési elve
Streak camera használata fotokróm spirobenzopirán vizsgálatában
Egy felvétel