GAZDA GRAS: generally recognized as safe Intracelluláris / szekréció Proteázok Termelés, szekréció szinkronizálás Gazda kialakítása.

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat
Advertisements

A mutagenezis célja, haszna Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára.
Mol. biol. módszerek Dr. Sasvári Mária
III. rész DNS-RNS-fehérje prokariótákban
Készítette: Bacher József
DNS replikáció Szükséges funkciók Iniciáció
Génexpresszió más (nem-E.coli) prokariótában
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
A génaktivitás szabályozása
Fonalas fágok I. M13, f1 és fd fágok, genomjuk 98%-ban azonos  rekombinálnak egymással Az érett fágok genomja egyszálú cirkuláris DNS, a sejten belül:
Génexpresszió szabályozása szintetikus oligonukleotidokkal
Rekombináns fehérjék termeltetési stratégiái
Biotechnológia Mikroorganizmusok - 2.
Bakteriális genom térképezés Készítette: Mlinarics Edina IV. Biológus Bioinformatika SZIT.
Kemogenomika Markus Bredel és Edgar Jacoby ‘Chemogenomics: an emerging strategy for rapid target and drug discovery’ című cikke alapján készítette: NAGYŐSZI.
Antibiotikumok fejlesztése a genomika segítségével
Genome2D: bakteriális transzkriptóma megjelenítését szolgáló eszköz (szoftver) Csernetics Árpád Bioinformatika SZIT ápr. 18.
Az immunoglobulin szerkezete
A génszabályozás prokariotákban és eukariótákban
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító.
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító.
génszabályozás eukariótákban
SV40 infekció transzformált sejt. „korai” gének (early - E) „késői” gének (late - L) 4.7 kb SV40 genom - kicsiny „tanulóvírus” fertőzést követően először.
Antigén receptorok Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet.
Öröklődés molekuláris alapjai
Pull down assay és RNAi módszerek bemutatása Sirokmány Gábor.
Heterológ fehérje-termelés prokarióta expressziós rendszerekben
Eukarióták Fő genetikai jellemzők Például az élesztő
Genomika I. gén x transzkripciós fúzió (operon) transzlációs
 fág Lambdoid fágok P22 P2, 4 P1 Mu
A λ bakteriofág +++. Kb db fág van a bioszférában Bakteriofágok vegetatív replikációs ciklusa.
Ahhoz, hogy dolgozni tudjunk égy adott génnel, vagy szekvenciával nagy mennyiségű DNS-re van szükségünk, ezért valamilyen módon „klónozni” kell, a gén.
Poszttranszlációs módosítások Készítette: Cseh Márton
Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30.
Plazmidok Készítette: Vásárhelyi Miklós. : E. Coli jól használható genetikai kísérletekben: Genomja kicsi(4,2*10 6 bázispár, kb. ezrede az emberének)
Készítette: Leidecker Orsolya
Készítette: Kiss László
Plazmid tartalmú mikrobák tenyésztése és kinetikája BIOREAKT 2009_MSc Genetikailag manipulált mikroorganizmusok (GMO)idegen-fehérje termelésének egyik.
FLUORESZCENS IN SITU HIBRIDIZÁCIÓ
Egészségügyi mérnököknek 2010
Arabidopsis thaliana tip120 inszerciós mutáns jellemzése
Arabidopsis thaliana tip120/cand1 T-DNS inszerciós mutáns jellemzése.
T-SEJTEK FEJLŐDÉSE ÉS DIFFERENCIÁCIÓJA.
AZ INTRACELLULÁRIS BAKTÉRIUMOK ELLENI IMMUNVÁLASZ
ELŐNYÖK ÉS LIMITÁCIÓK MOLEKULÁRIS MIKROBIOLÓGIAI VIZSGÁLATI MÓDSZEREK ALKALMAZHATÓSÁGA A BIOREMEDIÁCIÓBAN Balázs Margit.
1, GÉNKÖNYVTÁRAK ALKALMAZÁSA
IN VITRO MUTAGENEZIS Buday László.
Átfedô, rövid (25 nt) hibridizációs próbák (egy bázis eltolással )
A P elemek mobilitásának szabályozása
A P elem technikák: enhanszerek és szupresszorok azonosítása
A P elem technikák: enhanszerek és gének csapdázása
Kísérleteinkkel beállítottuk és validáltuk a fág display módszert monoklonális antitestek epitóp térképezésének az elvégzéséhez. A továbbiakban ezen a.
Golgi complex BIOLOGIA, SE,FOK
Immunbiológia - II. A T sejt receptor (TCR) heterodimer CITOSZÓL EXTRACELLULÁRIS TÉR SEJTMEMBRÁN kötőhely  lánc  lánc VV VV CC CC VV VV
Makromolekulák Simon István. Aminosav helyettesítési mátrix.
Sejtek genetikai módosítása (gének bevitele vagy eltávolítása)
Escherichia coli baktérium
DNS szintézis, replikáció Információ hordozó szerep bizonyítéka Avery-Grifith kísérlet Bakterifágos kísérlet.
Vakcinák. Edward Jenner Fekete himlő Tehén himlő Fekete himlő Tehén himlő
Géntechnikák labor kiselőadás Készítette: Nagy Zsuzsanna
RNS TUMORVÍRUSOK (Retrovírusok)
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
Új molekuláris biológiai módszerek labor
The lactose (lac) operon - an example for prokaryotic gene regulation
Új molekuláris biológiai módszerek
Proteomika, avagy a fehérjék „játéka”
Golgi complex BIOLOGIA, SE,FOK
A génexpresszió és az ezzel kapcsolatos struktúrák
Új molekuláris biológiai módszerek
EPIGENETIKA OLYAN JELENSÉGEKKEL FOGLALKOZIK, AMELYEK KÖVETKEZTÉBEN
Előadás másolata:

GAZDA GRAS: generally recognized as safe Intracelluláris / szekréció Proteázok Termelés, szekréció szinkronizálás Gazda kialakítása

VEKTOR Plazmid –RC –Θ, runaway Integrációs –Homológ rekombináció, géncsere –attP/B, int, xis –CRE-lox –transzpozon

Szelekciós marker Antibiotikum Food grade –Nisin –Esszenciális gén / hiánymutáns törzs (stabilitás is)

Promóter Konstitutív Szabályozható –Ki-be kapcsolás

Nagy sejtsűrűségű tenyészet high cell-density culture (HCDC) Limitál az oldott oxigén –Vitreoscilla hemoglobin gén

Prokarióta expressziós vektor

Expresszió optimalizálása E. coli- ban Promóter Transzkripciós terminátor Transzláció iniciáció Transzlációs enhncer (néhány gén nem transzlálódó 5’ régiója) Transzlációs terminátorok UAAu mRNS stabilitása: stem loop 5’ és 3’ végeken Kodon használat Proteolízis: N-end rule

Promóterek

Sejt kompartmentek

Szekréció

Bacillus subtilis

Tejsav baktériumok LAB functional food

LAB, vakcinálásra

Integráció DNS-t módosító enzimekkel

Pseudomonas

Élesztők

Huma -nizált Pichia Enzim Trichoderma reesei-ből

five major areas: (i) elimination of initiating a1,6-mannosyltransferase activity; (ii) proper subcellular localization of processing enzymes using combinatorial genetic libraries; (iii) using catalytic domains from several different sources, (iv) assuring the availability of UDP–GlcNAc in the Golgi; (v) rapid screening of large numbers of recombinant glycoproteins for the desired oligosaccharide structure.

Y2H

Integráció kromoszómába CRE-lox

G+ LGB

Phage-display, baktérium display

M13 filamentous phage

Phagemid vektorhoz helper fág kell

Oligo kazetta mutagenezis, ha a cél aminosavak egymáshoz közel vannak.

D N A s h u ff li n g K e v e r é s

Szelekció vezérelt evolúció után

Drog célpont keresés

Aspergillus

ProteolízisProteolízis