Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról.

Az előadások a következő témára: "Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról."— Előadás másolata:

1 Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról

2 Mikroszkópok hagyományos optikai mikroszkóp konfokális mikroszkóp fluoreszcencia-élettartam mérése Endoszkópok, távcsövek Fotoelektron-sokszorozó – sokcsatornás síkdetektor (photomultiplier)(microchannelplate detector) kapuzható képerősítő (gated image intesifier) Streak camera

3 Milyen információt szolgáltathat a lumineszcencia? Intenzitás-eloszlás Spektrális eloszlás Időbeli eloszlás, élettartam- eloszlás

4

5

6

7

8 Bazsalikom levél, szekréciós mirigy az epidermisz felszínén (a kék-zöld fluoreszcencia a sejtfal anyagok pl., ferulasav, viaszok, illetve a flavonoidok fluoreszcenciaja) exc = 351 nm emi = 385-470 nm kék 515-550 nm zöld > 650 nm vörös 100  m

9 Sorghum levél felszine: exc = 351 nm exc = 351 nm emi = 385-470 nm kék emi = 385-470 nm kék 515-550 nm zöld 515-550 nm zöld > 650 nm vörös > 650 nm vörös A 100  m AB D C BD C 32  m Fluoreszcencia réteg felvételek cirok levélen A felszínen a sejtfal alkotók kék-zöld fluoreszcenciája dominál, beljebb a fotoszintetizáló sejtek klorofilljáé.

10  exc = 351, 364nm, Ar laser 505 nm <  em <550 nm  em > 650 nm DanePy infiltrált spenót levél, a felszíntől 15  m mélységben (mezofill sejtek)

11 Összetett kép (zöld + vörös fluoreszcencia) és intenzitás eloszlás a jelzett egyenes mentén

12  exc = 351, 364nm 505 nm <  em <550 nm  em > 650 nm DanePy infiltrált spenót levél, fotoinhibíciós kezelés 45 min után: a levél fotoszintetikus aktivitásának kb. 2/3-a elvész, ha proteináz inhibitor jelenlében végezzük el a kísérletet, akkor kb 15% D1 protein károsodás detektálható jelentős pigment bleach (total pigment) és lipid peroxidáció még nincs 0’45’30’15’

13 Fluorescence lifetime imaging

14

15 A több-fotonos gerjesztés alapelve

16

17

18 Hőmérséklet-mérés foszforeszcencia- élettartam alapján

19 Fotoelektronsokszorozók

20 Fotoelektronsokszorozó működési elve

21 Microchannel plate detector működési elve

22 Kapuzható képerősítő működési elve

23 Példa a kapuzott képerősítő használatára

24 Streak camera működési elve

25 Streak camera használata fotokróm spirobenzopirán vizsgálatában

26 Egy felvétel