Laborállatok higiénés kategóriái Orvosi Mikrobiológiai Intézet

Az előadások a következő témára: "Laborállatok higiénés kategóriái Orvosi Mikrobiológiai Intézet"— Előadás másolata:

1 Laborállatok higiénés kategóriái Orvosi Mikrobiológiai Intézet
Dr. Anderlik Piroska ny. egyetemi tanár Professzor Emerítus Semmelweis Egyetem Orvosi Mikrobiológiai Intézet 2013

2 Russel and Burch : 3 R Concept: (1959 - )
Reduction, Refinement, Replacement 3R szabály: Állatszám csökkentés Finomítás Helyettesítés

3 Lehetőségek: finomítás, csökkentés a kísérleti állat kiválasztásában:
megfelelő fajtájú állat, beltenyésztett állat, megfelelő higiénés statusú állat, transzgén állat használata, helyettesítés magasabb >alacsonyabb rendűre váltás in vivo - ex vivo - in vitro módszerek

4 Kísérleti állatok közötti különbség lehet:
-Faji -Genetikai (pl. egértörzsek: beltenyészetek és kültenyészetek) -Genetikailag módosított törzsek -Higiénés (mikrobiológiai státus: higiénés kategória) -egyéb

5 A természetes környezet ember által történő
HIGIÉNÉS KATEGÓRIA: mesterséges csoportosítás A természetes környezet ember által történő különböző szintű, fokú megváltoztatása, befolyásolása a kísérleti eredmény javítása érdekében „ceteris paribus” minden más tekintetben azonos

6 külső, belső milliő: az adott élőlénnyel folyamatosan együtt élő,
Természetes környezet külső, belső milliő: az adott élőlénnyel folyamatosan együtt élő, vagy alkalomszerűen ott lévő más élő szervezetek (mikroorganizmusok) Ezek lehetnek: hasznosak, károsak A HIGIÉNÉS KATEGÓRIA: a káros elemek hiányának, (eltávolításának, távoltartásának) foka, mértéke

7 Higiénés státus A* fokozatai B* fenntartása: barrierek C* ellenörzése
D* előállítás E* egyéb felhasználás

8 A Gnotobiota Xenobiota A külső, belső milliő ismeretlen
A külső, belső milliő ismert Gnotobiota Xenobiota A külső, belső milliő ismeretlen A

9 GNOTOBIOTA A/ olyan élőlény, amely önmagán kívül más élőlényt,
mikroorganizmust nem hordoz: csiramentes, germfree, axenic, steril B/ olyan élőlény, melynek flórája, faunája ismert, kontrollált -

10 Gnotobiota lehet: Monokontaminált:
egy ismert makro-, vagy mikroorganizmust hordozó (korábban csíramentes) élőlény: dibiota, (fokozatai: tribiota, stb) „meghatározott„ flórájú (defined flora)

11 -Konvencionális: természetes mikroflórával rendelkező állat
XENOBIOTA -Konvencionális: természetes mikroflórával rendelkező állat -SPF: adott, meghatározott pathogéneket nem hordozó állat (specific pathogen free) -VAF: adott, meghatározott vírusok elleni ellenanyagokkal nem rendelkező állat (viral antibody free) (COBS: cesarean obtained, barrier sustained) (MD : minimal disease)

12 CSIRAMENTES MINDEN VAGY SEMMI KONVENCIONÁLIS

13 Konvencionális bélfóra

14 K O N V E I L S

15

16 Higiénés kategóriák fenntartása: barrierek
- abszolut barrier – izolátor - csíramentes - SPF barrier - reverz barrier - egyéni barrier -barrier nincs, konvencionális

17 K O N V E C I Á L S

18

19 Reverz barrier

20 S P F, V A F

21

22 IVC Rendszer Individually Ventillated Cages

23 IVC rendszer

24 IVC szellőztetett állvány (CRM)
A szellőztetett állvány koncepciója - A szellőztetett állvány (IVC) szűrővel ellátott ketrecek sorából áll és egy levegőcserélő rendszer tartja fent a ketrecek belsejé- nek levegőviszonyait Egymástól független ketrecek - a ketrecek azok mikrobiológiai határainak megsértése nélkül kezelhetők, ugyanakkor a személyzet védett marad az aeroallergén anyagoktól - különböző egészégi státuszú állatok tartására alkalmas - különböző törzsek tartására alkalmas - transzgén állatok tartására alkalmas FOLYT.

25 FOLYT Biztonság - aeroallergén anyagok kiszabadulása elleni védelem
Környezeti minőség - CO2 és NH3 kialakulását megakadályozza - Megakadályozza a magas hőmérséklet és páratartalom kialakulását - Alacsony zaj és vibrációs, szint - Légáramlás monitorozott FOLYT

26

27 ZEBRAHAL

28

29

30

31

32 C HIGIÉNÉS KATEGÓRIÁK KONTROLLJA
Mikrobiológiai vizsgálatok 1. Az állat mikrobiológiai kontrollja 2. A Barrier működés kontrollja 3. Kezelő személyzet kontrollja

33 Sterilpróba 1

34 Konvencionális állat konvencionális állatház
jellegzetes szag SPF, VAF állat SPF állatház Csíramentes állat izolátor szagtalan

35 Sterilpróba 2

36 Konvencionális és csiramentes állat közötti különbségek
Csíramentes Béltartalom híg, zöldes Megacolon bélnyálkahártya megújulása lassú Nyirokszervek fejletlenek Centrum germinativum hiány Az állat szagtalan Vitaminhiány Rezisztencia cytostaticumokkal, rtg sugárral szemben Konvencionális Béltartalom formált, barnás Colon norm nagyságú Nyirokszervek életkornak megfelelően fejlettek Jellegzetes állat szag Nincs vitaminhiány Érzékenység cytostaticumokkal, rtg-vel szemben

37

38

39 K O N V E C I O N Á L I S C S I R A M E N T E S

40 D Gnotobiota állat előállítása hiszterotomia, hiszterektomia utján
-mesterséges táplálás, -dajkaság embriotranszfer: beágyazódás előtti embrió 1-2 napos, 1-2 sejtes embrió átvitele álvemhes nösténybe, ami kihordja azt cryoprezervatió (mélyhütve tárolható) vásárlás: -kész állat, -cryopreservatum Rederiválás: jobb higiénés fokozatú állat előállítása ma a cryopreservatum a javasolt

41 hiszterotomia

42 hiszterektomia

43

44 V é t e l

45

46

47

48

49

50 COBS kontroll

51

52 E

53

54

55

56

57