ANTIGÉN PREZENTÁCIÓ T – SEJT FELISMERÉS T – SEJT AKTIVÁCIÓ T – SEJT EFEKTOR FUNKCIÓK

Limfocita altípusok és effektor funkcióik B sejtek és makrofágok aktivációja SEGÍTŐ T SEJT Th Th Vírussal fertőzött sejtek elpusztítása CITOTOXIKUS T SEJT Tc/CTL CTL Ellenanyag termelés PLAzMASEJT PC T B T sejtek B sejtek CLP Közös limfoid előalak

B-limfocita Ölő T-limfocita Tc Segítő T-limfocita Th FELISMERÉSEFFEKTOR SEJT Plazmasejt Sejtölés Makrofág aktiválás Limfocita aktiválás Gyulladási folyamat Ellenanyag termelés citokinek BCR + antigén TCR + peptid + MHC-I TCR + peptid + MHC-II

Hogy képes 6 nem variábilis MHC molekula 1,000,000,000,000,000 különböző peptidet kellő erősséggel megkötni? Hol történik a peptid kötés? A T sejtek antigén felismerő receptorainak becsült száma 1,000,000,000,000,000 ( ) Ennyi különböző antigén eredetű peptid?

Az endogén fehérjékből (vírus, tumor) származó peptideket az I. típusú MHC molekulák kötik Tc Endogén Ag AZ EXOGÉN ÉS ENDOGÉN ANTIGÉNEK FELISMERÉSE Exogén Ag Th Az exogén fehérjékből származó peptideket (extracelluláris patogén, allergén) a II. típusú MHC molekulák kötik

Flexibilis kötőhely? A sejtfelszínen az ilyen kötőhely nem lenne képes elég nagy erősséggel kialakítani az MHC – peptid – TCR hármas komplexet megakadályozni a peptidek lecserélődését extracelluláris peptidek által Olyan kötőhely, amely elég rugalmas bármely peptid megkötésére?

Flexibilis kötőhely? A kötőhely kialakulásának kezdeti, intracelluláris szakaszában a peptid irányítja az MHC molekula térszerkezetét Laza, rugalmasZárt Egy adott MHC molekula számára lehetővé teszi, hogy sok különböző peptiddel lépjen kapcsolatba a peptidet a sejtfelszínen nagy affinitással kösse stabil komplexeket képezzen a sejtfelszínen csak olyan molekulákat szállítson a sejtfelszínre, amelyek intracellulárisan peptidet kötöttek

Hogy képes 6 nem variábilis molekula 1,000,000,000,000,000 különböző peptidet megkötni? A T sejtek antigén felismerő receptorainak becsült száma 1,000,000,000,000,000 ( ) MHC molekulák Amíg a peptid kötés nem történik meg, flexibilis konformációt vesznek fel A peptidkötést konformáció változás kíséri, ami növeli a komplex stabilitását A peptid „befogására” kevés horgonyzó aminosav szolgál - a horgonyzó aminosavak közt különböző szekvenciák lehetnek - különböző hosszúságú peptidek kötődhetnek

AZ ENDOGÉN ANTIGÉN BEMUTATÁSI ÚT Tc-sejt Proteaszóma LMP2/LMP7 FEHÉRJE SAJÁT ANTIGÉN TAP1/2 gp96 calnexin α-lánc α-lánc+β2mMHC+peptid MHC-I + Ag peptid MHC-I + saját peptid ZÁRTNYITOTT MHC-I, LMP2/7, TAP IFN  általi koordinált kifejeződés

ER membrane Lumen of ER Cytosol Transporters associated with antigen processing (TAP1 & 2) A transzporter 8 aminosavnál hosszabb, hidrofób C-terminálissal rendelkező peptideket pumpál be az ER-ba TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide ER membrán ER lumen Citoplazma TAP-1 TAP-2 Peptide ATP-binding cassette (ABC) domén Hidrofób transzmembrán domén Proteaszóma által termelt peptid antigének

Endoplazmatikus retikulum Az újonnan képződő (nascens)  -lánchoz kalnexin kötődik TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide TAP-1 TAP-2 Peptide A β2-m kötődik az α- lánchoz és stabilizálja a laza molekulát A tapasin, a kalretikulin, és a TAP 1 & 2 a laza MHC molekulával komplexet alkot A citoplazmatikus peptidek kötődnek az MHC molekulához és stabilizálják a szerkezetet Az MHC I molekulák kialakulása és feltöltése

Th-sejt INVARIÁNS LÁNC (Ii) 1.Chaperon – konformáció 2.Peptidkötőhely gátlása 3.Szállító/visszatartó molekula AZ EXOGÉN ANTIGÉN BEMUTATÁSI ÚT DMA/DMB 1. A peptidet befogadó konformáció fenntartása 2. A CLIP és az exogén fehérjékből származó peptidek lecserélése ZÁRTNYITOTT Ii+αβ CLIP DMA/B MHC-II + Ag peptid MHC-II + saját peptid

AZ I ÉS II TÍPUSÚ MHC MOLEKULÁK KIFEJEZŐDÉSÉNEK SZABÁLYOZÁSA IFNγ IFNγR A II típusú immun IFNγ fokozza az MHC expressziót Gyulladási citokinek és IFNγ hatására az MHC II expresszió egyes szöveti sejteken (endotél, asztrocita, mikroglia) is kiváltható Co-ordinated upregulation of MHC-I, TAP, LMP and MHC-II, DM, Ii

Az MHC – II EPITÓPOK KÉPZŐDÉSEAZ MHC – I EPITÓPOK KÉPZŐDÉSE Virus fehérje B27 A2 B35 C42 HLA-A,B,C kötés A Tc válasz néhány epitóp ellen irányul VALAMELYIK PATOGÉN FEHÉRJE ELLEN BIZTOSÍTJA A FELISMERÉST A Th válasz átfedő epitópok ellen irányul MINDEN FEHÉRJE ELLEN BIZTOSÍTJA A FELISMERÉST HLA-DR1/HLA-DR4 Átfedő peptidek HLA-DQ2/HLA-DQ7

Az EBV-specifikus CTL válasz célpontjai A poliklonális CTL válasz elsősorban a litikus antigének és az A poliklonális CTL válasz elsősorban a litikus antigének és az EBNA3,4,6 nukleáris fehérjék ellen irányul EBNA3,4,6 nukleáris fehérjék ellen irányul Erősen fókuszált egy adott MHC - peptid kombinációra Erősen fókuszált egy adott MHC - peptid kombinációra Az endogén EBNA1 nem processzálódik és így nem ismerhető fel Az endogén EBNA1 nem processzálódik és így nem ismerhető fel EBNA3 EBNA5EBNA2 WWWWWWWWWWWW ZZ WWWWWWWWWW CC YY HHFFQQUUPPOOMMSSLLEERRKKBBDDTTXXVVIIAAGGNN hhee tt NN hh eettEBNA6 EBNA1LMP2 EBNA4 LMP1 - BZLF1BMLF1BMRF1BHRF1BARF0 + ± (?) ±

MHC IMHC II Kötött peptidforrássaját vagy idegen fehérjék méret8-10 aminosav13-25 aminosav heterogenitáskorlátozottátfedő peptidek természetescitoplazmatikus és magi fehérjék~70% MHC eredetű, membrán- és extra- celluláris fehérjék Peptid képződéshelyecitoplazmavezikulumok endo/lizoszóma enzimekproteaszóma LMP-2, LMP-7 szabályozó egységek savas proteázok katepszinek transzportTAP – peptid méret C-terminális cytoplasm ER nincs MHC transzport nincsIi - irányít, visszatart ER vezikuláris rendszer speciális vezikulum CIIV MHC - peptide kölcsönhatáshelyeERspeciális vezikulum, CIIV chaperonokcalnexin, topozin, calretuculinIi, DMA/B MHC - peptid komplexek a sejtfelszínen stabil komplexek a sejt belső környezetét tükrözik kevés nem stabil üres molekula nincs peptid disszociáció, csere stabil complexek a sejt belső/külső környezetét tükrözik kevés recirkuláló és CLIP-peptidet kötő molekula kismértékű peptid csere ANTIGEN ÁTALAKÍTÁS ÉS BEMUTATÁS