Laborállatok higiénés kategóriái Orvosi Mikrobiológiai Intézet Dr. Anderlik Piroska ny. egyetemi tanár Professzor Emerítus Semmelweis Egyetem Orvosi Mikrobiológiai Intézet 2013

Russel and Burch : 3 R Concept: (1959 - ) Reduction, Refinement, Replacement 3R szabály: Állatszám csökkentés Finomítás Helyettesítés

Lehetőségek: finomítás, csökkentés a kísérleti állat kiválasztásában: megfelelő fajtájú állat, beltenyésztett állat, megfelelő higiénés statusú állat, transzgén állat használata, helyettesítés magasabb >alacsonyabb rendűre váltás in vivo - ex vivo - in vitro módszerek

Kísérleti állatok közötti különbség lehet: -Faji -Genetikai (pl. egértörzsek: beltenyészetek és kültenyészetek) -Genetikailag módosított törzsek -Higiénés (mikrobiológiai státus: higiénés kategória) -egyéb

A természetes környezet ember által történő HIGIÉNÉS KATEGÓRIA: mesterséges csoportosítás A természetes környezet ember által történő különböző szintű, fokú megváltoztatása, befolyásolása a kísérleti eredmény javítása érdekében „ceteris paribus” minden más tekintetben azonos

külső, belső milliő: az adott élőlénnyel folyamatosan együtt élő, Természetes környezet külső, belső milliő: az adott élőlénnyel folyamatosan együtt élő, vagy alkalomszerűen ott lévő más élő szervezetek (mikroorganizmusok) Ezek lehetnek: hasznosak, károsak A HIGIÉNÉS KATEGÓRIA: a káros elemek hiányának, (eltávolításának, távoltartásának) foka, mértéke

Higiénés státus A* fokozatai B* fenntartása: barrierek C* ellenörzése D* előállítás E* egyéb felhasználás

A Gnotobiota Xenobiota A külső, belső milliő ismeretlen A külső, belső milliő ismert Gnotobiota Xenobiota A külső, belső milliő ismeretlen A

GNOTOBIOTA A/ olyan élőlény, amely önmagán kívül más élőlényt, mikroorganizmust nem hordoz: csiramentes, germfree, axenic, steril B/ olyan élőlény, melynek flórája, faunája ismert, kontrollált -

Gnotobiota lehet: Monokontaminált: egy ismert makro-, vagy mikroorganizmust hordozó (korábban csíramentes) élőlény: dibiota, (fokozatai: tribiota, stb) „meghatározott„ flórájú (defined flora)

-Konvencionális: természetes mikroflórával rendelkező állat XENOBIOTA -Konvencionális: természetes mikroflórával rendelkező állat -SPF: adott, meghatározott pathogéneket nem hordozó állat (specific pathogen free) -VAF: adott, meghatározott vírusok elleni ellenanyagokkal nem rendelkező állat (viral antibody free) (COBS: cesarean obtained, barrier sustained) (MD : minimal disease)

CSIRAMENTES MINDEN VAGY SEMMI KONVENCIONÁLIS

Konvencionális bélfóra

K O N V E I L S

Higiénés kategóriák fenntartása: barrierek - abszolut barrier – izolátor - csíramentes - SPF barrier - reverz barrier - egyéni barrier -barrier nincs, konvencionális

K O N V E C I Á L S

Reverz barrier

S P F, V A F

IVC Rendszer Individually Ventillated Cages

IVC rendszer

IVC szellőztetett állvány (CRM) A szellőztetett állvány koncepciója - A szellőztetett állvány (IVC) szűrővel ellátott ketrecek sorából áll és egy levegőcserélő rendszer tartja fent a ketrecek belsejé- nek levegőviszonyait Egymástól független ketrecek - a ketrecek azok mikrobiológiai határainak megsértése nélkül kezelhetők, ugyanakkor a személyzet védett marad az aeroallergén anyagoktól - különböző egészégi státuszú állatok tartására alkalmas - különböző törzsek tartására alkalmas - transzgén állatok tartására alkalmas FOLYT.

FOLYT Biztonság - aeroallergén anyagok kiszabadulása elleni védelem Környezeti minőség - CO2 és NH3 kialakulását megakadályozza - Megakadályozza a magas hőmérséklet és páratartalom kialakulását - Alacsony zaj és vibrációs, szint - Légáramlás monitorozott FOLYT

ZEBRAHAL

C HIGIÉNÉS KATEGÓRIÁK KONTROLLJA Mikrobiológiai vizsgálatok 1. Az állat mikrobiológiai kontrollja 2. A Barrier működés kontrollja 3. Kezelő személyzet kontrollja

Sterilpróba 1

Konvencionális állat konvencionális állatház jellegzetes szag SPF, VAF állat SPF állatház Csíramentes állat izolátor szagtalan

Sterilpróba 2

Konvencionális és csiramentes állat közötti különbségek Csíramentes Béltartalom híg, zöldes Megacolon bélnyálkahártya megújulása lassú Nyirokszervek fejletlenek Centrum germinativum hiány Az állat szagtalan Vitaminhiány Rezisztencia cytostaticumokkal, rtg sugárral szemben Konvencionális Béltartalom formált, barnás Colon norm nagyságú Nyirokszervek életkornak megfelelően fejlettek Jellegzetes állat szag Nincs vitaminhiány Érzékenység cytostaticumokkal, rtg-vel szemben

K O N V E C I O N Á L I S C S I R A M E N T E S

D Gnotobiota állat előállítása hiszterotomia, hiszterektomia utján -mesterséges táplálás, -dajkaság embriotranszfer: beágyazódás előtti embrió 1-2 napos, 1-2 sejtes embrió átvitele álvemhes nösténybe, ami kihordja azt cryoprezervatió (mélyhütve tárolható) vásárlás: -kész állat, -cryopreservatum Rederiválás: jobb higiénés fokozatú állat előállítása ma a cryopreservatum a javasolt

hiszterotomia

hiszterektomia

V é t e l

COBS kontroll

E