Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Www.szentagothailab.sote.hu. Glükokortikoid receptorok felépítése, működése.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Www.szentagothailab.sote.hu. Glükokortikoid receptorok felépítése, működése."— Előadás másolata:

1

2 Glükokortikoid receptorok felépítése, működése

3 idegrendszer endokrin rendszer Egyedfejlődés, spermiogenezis (autokrin: Sertoli sejtek, parakrin: stigma fibroblasztok-ovuláció) Szignalizációs kapcsolatok

4 Hormonok Nagyobb távolságból ható kémiai szignál molekulák melyeket endokrin mirigyek termelnek és a vérkeringés segítségével jutnak el a célszervek sejtjeihez. Peptid, amin és szteroid Szteroid hormonok: koleszterolból képződnek, lipofil természetűek, nem tárolódnak, szintézisük dinamikusan követi a fiziológiás igényeket. glukokortikoidokmineralokortikoidok D 3 hormon (D vitamin sz.) Szexuálszteroidok stresszválasz

5 Receptorok osztályozása Lokalizáció Sejtmembrán Citoplazma Sejtmag Ligand Hormon Neurotranszmitter Immun Receptorok jellemzői Specificitás Affinitás Telíthetőség Reverzibilis Sejt specifikus válasz Down reguláció

6 Regulation of endogenous glucocorticoid synthesis by the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in humans. CRH, corticotropin- releasing hormone; ACTH, adrenocorticotropic hormone. Derek W. Cain, John A. Cidlowski Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism, Volume 29, Issue 4, 2015, 545–556

7

8 CORTICOSTEROID RECEPTORS IN THE BRAIN MINERALOCORTICOID Type I, MR GLUCOCORTICOID Type II, GR 0.5 nM2,5-5 nM Kd 89%10 % Occupancy, basal Occupancy, stress 97%75% Distribution Hippocampus CA1 Lateral septum Dentate gyrus NTS, CeA, PVN, LC

9 Feedback a HPA tengelyen: Long-loop Feedback (Kort-CRH) Short-loop feedback (ACTH-CRH) Ultrashort-loop: CRH-CRH Fast feedback (sec-min) Intermediate feedback (hrs) Slow feedback (days)

10 Szteroid szintézis

11 L. Stryer

12 Koleszterol transzport koleszterolKoleszterol-észterek Lipoproteinek szállítják célszervek ACAT máj véráram LDL Koleszterol-észterek ApoB LDL receptorok ApoB LDL Koleszterol-észterek ER Receptor mediált endocitózis Inzulin, glukagon kontroll mevalonát Low Density Lipoprotein Vér sejtmembrán

13 Cortisol: dominant glucocorticoid in humans and the domestic animals synthesized from progesterone in the zona fasciculata of the adrenal cortex, involved in stress adaptation, elevates blood pressure and Na+ uptake, numerous effects on the immune system

14 Adrenocorticotropic hormone (ACTH): cortisol Angiotensin II/III: aldosterone Nyúl: cortisol, corticosteron (50-50%) Madarak: corticosteron Ember: cortisol Patkány, egér: corticosteron Peptid hormon Szteroid hormon A szteroid szintézis hormonális szabályozása

15 Szteroid hormon transzport, lebomlás

16 Szteroidok szabad formában szállítódnak a véráramban (kis hányaduk) de túlnyomóan transzport fehérjékhez kötöttek (degradáció csökkenése és gyors szállítás) Szteroid hormon transzport transzport fehérjék: -albuminok: kis affinitás, nagy kapacitás, nem specifikus -globulinok: nagy affinitás, kis kapacitás, nagyobb specificitás (Sex Steroid Binding Globulin szállítja a Tesztoszteront és Ösztrogént vagy a corticosteroid és progesterone szállításban is részt vevő Corticosteroid Binding Globulin)

17 Szteroid metabolizmus, lebomlás

18

19 Szteroid recepció és szignál transzdukció

20

21

22 Glükokortikoid hormon recepció I. Hsp70 Hsp90 foszforiláció Grip1 GRIP-1 (glucocorticoid receptor interacting protein-1

23 Szteroid hormon recepció II. (klasszikus) Corticosteroid receptors are classified into two subtypes, the mineralocorticoid receptor (MR) and the glucocorticoid receptor (GR). The MR has high affinity for corticosterone ⁄ cortisol, as well as aldosterone, whereas the GR has a higher affinity for dexamethasone (DEX) and an approximately 10-fold lower affinity than the MR for corticosterone. L. Stryer GR GR structural domains and sites of posttranslational modification. Numbers indicate position of amino acid residues in human GR. The N-terminal transactivation domain (NTD), DNA-binding domain (DBD), hinge region (H), and ligand-binding domain (LBD) for GR are shown. Regions associated with transactivation (AF1 and AF2), receptor dimerization, and nuclear localization are shown by red bars. Also shown are residues subject to translational modification by phosphorylation (P), sumoylation (S), ubiquitination (U), and acetylation (A)

24 Generation of diverse GR isoforms by alternative splicing and translation initiation sites. Multiple GR isoforms with distinct signaling properties are generated from a single GR primary transcript. Five splice variants (GRα, GRβ, GRγ, GR-A, and GR-P)... Derek W. Cain, John A. Cidlowski 2015 Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism Volume 29, Issue 4, 2015, 545–556 In most tissues and cell lines, GRβ is expressed at lower levels than GRα GRα-C3 isoform (most abundant) GRα-D isoforms are the least active

25 GRβ was originally identified as a dominant negative inhibitor of GRα GRβ inhibition of GRα include competition for GREs, interference with coregulators, and formation of inactive GRα/GRβ heterodimers GRβ levels are also elevated in glucocorticoid-resistant cases of asthma, rheumatoid arthritis, ulcerative colitis, and systemic lupus erythematosus. High GRβ expression is also associated with glucocorticoid resistance in acute lymphoblastic leukemia and chronic lymphocytic leukemia and. Manipulating GRα/GRβ expression ratios, therefore, may provide a means to modulate glucocorticoid sensitivity. Proinflammatory cytokines and microbial superantigens enhance GRβ expression in mononuclear cells, an effect associated with glucocorticoid resistance

26 Szteroid receptor felépítése Zink finger AF1, AF2 – transzaktivátor helyek SHR – Steroid Hormone Receptor

27 Derek W. Cain, John A. Cidlowski Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism, Volume 29, Issue 4, 2015, 545–556 Pathways of glucocorticoid signaling through the GR

28 GRE-Glucocorticoid Responsive Element GR (homodimer) DNS GR- Glucocorticoid Receptor GRE -GRE+GRE transzaktiváció GR (monomer) DNS AP1 NFkb GR a b c transzrepresszió

29 HRE- Hormone Responsive Element GR (homodimer) T 3, D 3 rec. (heterodimer) RXR- 9-cis retinsav receptor RXR GR- Glukocorticoid Receptor Nukleáris receptorok a DNS oldalról DNS -HRE+HRE

30 Cort, GR és a stressz

31 Hipoglikémia

32 Agrp in hypothalamus (stress) ** *

33 Restraint

34 Agrp in hipothalamus (restraint 30 min) * **

35 ccl2 Faoud T. Ishmael et al The Journal of Immunology THE GLUCOCORTICOID RECEPTOR AS AN RNA-BINDING PROTEIN

36 Hana Cho 2015 PNAS Regulation of mRNA stability proline-rich nuclear receptor coregulatory protein 2 (PNRC2) GR-mediated mRNA decay (GMD) upstream frameshift 1 (UPF1

37 miRNA

38 Roldan M de Guia et al 2014 EMBO miR-379 mediates GR effects

39 Quantitative miR-379 PCR levels in livers of db/db, New Zealand obese (NZO) mice, and corresponding controls—wt and New Zealand black (NZB)

40 Quantitative miR-379 levels in livers of db/db mice treated with control or GR-specific shRNA adenovirus (n = 5) (C) or hepatic GR KO (D). Bar graphs show mean SEM; t- test: *P < 0.05.

41 HPA, hypothalamic–pituitary–adrenal axis; GC, glucocorticoids; GR, glucocorticoid receptor; GRE, glucocorticoid response elements; miR, microRNA; LSR, lipolysis- stimulated lipoprotein receptor; LDLR, low-density lipoprotein receptor; VLDL, very- low-density lipoprotein receptor. GR-dependent control of miR-379 in lipid metabolism.

42 miR-18 and 124a expression during postnatal development mir-18 mir-124a

43 GR protein level Sejtvonal Stress Hyporesponsive Period

44 Nemoto et al Mol Endocrinol, October 2013, 27(10):1593–1602 miR-449a Suppresses CRF-R1 Expression in Pituitary miR-449a AP miR-449a LNA in situ AP

45 miR-449a Suppresses CRF-R1 Expression in Pituitary

46 Glükokortikoid recepció szabályozási lehetőségei Receptorok amplifikáció amplifikáció CBG koaktiváció Foszforiláció (3 hely, cort resist.) metiláció miRNA poliadeniláció GR-mediated mRNA decay (GMD)

47 Szteroidok diagnosztikája -RIA, ELISA -Szteroid receptorok expressziójának elemzése szelekciós markerként: molekulális biológiai módszerek, in situ hibridizáció, q Real-Time PCR - Szteroid receptor fehérje kimutatás immunohisztokémiával Jelen és jövőbeni lehetőségek Szteroidok kimutatása ürülékből RIA és ELISA módszerekkel Szteroidok kimutatása nyálból ELISA módszerekkel (MTA-KOKI és Salimetrics) Non invasív (animal welfare)

48 Köszönöm a figyelmet és sok sikert a további tanuláshoz, munkához


Letölteni ppt "Www.szentagothailab.sote.hu. Glükokortikoid receptorok felépítése, működése."

Hasonló előadás


Google Hirdetések