ANYAGCSERE CSONTBETEGSÉGEK 2003 SE I. Belklinika.

Az előadások a következő témára: "ANYAGCSERE CSONTBETEGSÉGEK 2003 SE I. Belklinika."— Előadás másolata:

1 ANYAGCSERE CSONTBETEGSÉGEK 2003 SE I. Belklinika

2 Új genetikai eredmények: új technikák, irányzatok és újabb terápiák a nem is távoli jövőben?!

3 Polimorfizmus-vizsgálatok és a BMD, 2002 (lerágott csont?) I:androgén receptor (AR) gén CAG ismétlődése (1 exon). AR van az osteoblastok és az osteoclastok felszínén. férfiak hypoandrogenizmusa osteoporosist okoz. ha a CAG ismétlődés > 20 a femur BMD-je alacsonyabb, mint azokban ahol a CAG ismétlődés < 20 (nők, n = 168) II:interleukin 6 (IL-6) gén G/C polimorfizmusa (GG, CC, GC). az eltérő genotípusokhoz eltérő IL-6 szintek tartoznak. citokin, melynek ismert a szerepe a csontritkulásban. OFELY vizsg. adatai, 4 éven át, n = 298 postmenop. nő. CC genotípusban 3-7%-al nagyobb a csontvesztés vs. GG

4 Polimorfizmus-vizsgálatok és a BMD, 2002 III:1-es típusú kollagén A1 lánc (co1IA1) génjének G1245T polimorfizmusa (GG, TT, GT). ez az Sp1 kötő régió  kollagén kialakulást befolyásolja. Ismert: a T allélt (variációt) hordozókban alacsonyabb a BMD és fokozott a törések száma, szemben az G genotípusúakkal. 2002-es vizsgálat: n = 221 postmenop. nő, igazolta a fentit. IV:klotho gén CA ismétlődése. ún. 5-ös típus: BMD alacsonyabb, 7-es típus magasabb 9-es típus: L4/5 és L5/S1 spondylosissal asszociált

5 Polimorfizmus-vizsgálatok és a BMD, 2002 V :MTHFR gén C677T pontmutációja.

6 5,10-metiléntetrahidrofolát reduktáz (MTHFR) gén C677T pontmutációja (CC, CT, TT) Az emelkedett homocisztein szint rizikófaktora az artériás, vénás tromboemboliás és kardiovaszkuláris betegségek kialakulásának. Az MTHFR enzim a homociszteint metioninná alakítja, csökkentve így a homocisztein plazmaszintjét. Az MTHFR gén mutációja (TT) az enzim csökkent aktivitását okozza. A mutáció (azaz a homociszteinaemia) előfordulása 5%, ez a trombózis- rizikót (az aterosclerosist is) kétszeresére emeli. Terápia: fólsav.

7 Polimorfizmus-vizsgálatok és a BMD, 2002 V :MTHFR gén C677T pontmutációja. A homocisztein gátolja a kollagén-keresztkötéseinek kialakulását. Az aterosclerosis és az osteoporosis között asszociáció. Postmenopauzában magasabb a homocisztein szint, mint premenopauzában. Dán vizsgálat: 1748 postmenopauzás nő, TT genotípusban a gerincen és a csípőn mérve alacsonyabb volt a BMD. Ezt cáfoló eredmény is van (Framingham vizsgálat)!

8 Új gének src:legelső felfedezett onkogén, foszforilál és ezáltal aktivál számos növekedési faktort és jelátvitelben fontos fehérjét  sejtosztódás, proliferáció. Az osteoclastok nagy mennyiségben tartalmazzák, azaz osteoporogén. Mehanizmus: - integrinek  microtubulusok  mozgás - exocytosis - RANK / RANKL kapcsolódást fokozza (osteoclast-aktiváció) Src „knock out” egér: magas a BMD, osteopetrosis. Src inhibítor: C6P77675, új terápia!

9  Startpont G 0 fázis M fázis G 1 fázis S fázis G 2 fázis sejtciklus + Növekedési faktorok (src, ras, fos, jun, myc, erbB2) Ciklin-CDK komplex src P21/ras, p27, rho + + + - - statinok

10 Új gének src:legelső felfedezett onkogén, foszforilál és ezáltal aktivál számos növekedési faktort és jelátvitelben fontos fehérjét  sejtosztódás, proliferáció. Az osteoclastok nagy mennyiségben tartalmazzák, azaz osteoporogén. Mehanizmus: - integrinek  microtubulusok  mozgás - exocytosis - RANK / RANKL kapcsolódást fokozza (osteoclast-aktiváció) Src „knock out” egér: magas a BMD, osteopetrosis. Src inhibítor: C6P77675, új terápia!

11 A src onkogén szerepe a csontsejtben: RANK, rho, exocytosis!

12 Új gének src:legelső felfedezett onkogén, foszforilál és ezáltal aktivál számos növekedési faktort és jelátvitelben fontos fehérjét  sejtosztódás, proliferáció. Az osteoclastok nagy mennyiségben tartalmazzák, azaz osteoporogén. Mehanizmus: - integrinek  microtubulusok  mozgás - exocytosis - RANK / RANKL kapcsolódást fokozza (osteoclast-aktiváció) Src „knock out” egér: magas a BMD, osteopetrosis. Src inhibítor: C6P77675, új terápia!

13 src-inhibitor kezelés hatása a csont mikroarchitekturájára, patkányban

14 Új gének fos:onkogén, foszforilál és ezáltal aktivál számos növekedési faktort és jelátvitelben fontos fehérjét  sejtosztódás, proliferáció. Fos „knock out” egér: magas a BMD, osteopetrosis, alig van osteoclast, nincs foga. A nicotin növeli a fos szintjét! (a dohányzás rizikófaktor)

15  Startpont G 0 fázis M fázis G 1 fázis S fázis G 2 fázis sejtciklus + Növekedési faktorok (src, ras, fos, jun, myc, erbB2) Ciklin-CDK komplex src P21/ras, p27, rho + + + - - statinok

16 Új gének SHIP:a foszfatidilinozitol-trifoszfát szignalizációs rendszer fontos tagja gátolja az osteoclast formációt és funkciót SHIP „knock out” egér: az osteoclast szám duplájára nő az IL-6 szint nő trabekuláris csontvolumen 

17 Új metodikák, gyors sikerek!? Microarray (DNS-chip) röviden a metodika I: Forradalmasítja a kutatást, a diagnosztikát. Gének expresszióját, ismert DNS szakaszok (gének) meglétét vagy hiányát, mutációját vizsgálja szövetből (pl.: csont) kivont mintából. Csontból mRNS-t kell kivonni, majd „visszaírni” DNS-é (cDNS). A gén működésének megítéléséhez az mRNS-t kell vizsgálni. Ugyanis amennyiben a gén működik (információ) mRNS szintetizálódik róla, majd ezután fehérje keletkezik (funkció).

18 röviden a metodika II: A DNS microarray lényege: homológ szekvenciák hibridizációja (DNS-DNS kapcsolódás). A cDNS-t fluorescens anyaggal kell jelölni (zöld és piros). Üveglemezre (75x25x1mm) oligonukleotidokat visznek fel. Ezek a mesterségesen előállított (és egy génre speciálisan jellemző szekvenciát tartalmazó) oligonukleotidok minimális homológiát mutatnak más gének szakaszaival, azaz a hibridizáció specifikus. A jelölt cDNS-eket a lemezre kell vinni, majd lezajlik a hibridizáció. Ahol létrejött a kapcsolat, ott színreakció lesz (zölden vagy pirosan vagy sárgán fog világítani).

19

20 Eredmények microarray használatával (példák 2002-ből) - ovariectomizált egér kezelése ösztrogénnel - 125 gént vizsgáltak, egér humerusból kivonva - ebből 12-t regulált az ösztrogén-kezelés, 7 új volt - a BMP-2 az osteoblast differenciációban fontos - BMP-2 vel kezeltek osteoblastokat, és 57-t találtak, melyeket regulált a BMP-2

21 ANYAGCSERE CSONTBETEGSÉGEK 2003 SE I. Belklinika