Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1."— Előadás másolata:

1 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1

2 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna MSIonforrásAnalizátorDetektor Vákuum rendszer Adatgyűjtés, vezérlés

3 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna API-MSELECTROSPRAY: Ionization process which uses electrical fields to generate charged droplets and subsequent analyte ions by ion evaporation for MS analysis. PNEUMATICALLY ASSISTED ELECTROSPRAY: Same as electrospray (above) except the initial droplet formation is the result of pneumatic nebulization.APCI: A gas phase chemical ionization (CI) process where the solvent acts as the CI reagent gas to ionize the sample.APPI: Krypton lamp producing ultraviolet light ionizes gas phase analytes or dopants with subsequent gas-phase reactions. AP-MALDI Analyte and matrix spotted on plate. Matrix absorbs laser radiation causing matrix and sample to vaporize and ionize the sample. Additional ions may be formed in the gas-phase. …

4 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna API-MS Molecular Weight Analyte Polarity API/Electrospray APPI APCI 1000 100,000 10,000 nonpolar very polar AP/MALDI

5 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Electrospray ionization - ESI

6 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI High Voltage Mesh Assembly Nebulizer Capillary Entrance Hinges for rapid changeover from ESI to APCI

7 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI Vcap Fragmentor Nebulizer Pressure Drying Gas Temperature and Flow

8 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI Hatékony detektálás feltétele a vizsgálandó vegyület ionos formájának jelenléte az oldatban: Pozitív ion üzemmódban: Bázikus vegyületek (pl. peptidek, bázikus gyógyszermolekulák) Csökkentjük a pH-t:ecetsavval, hangyasavval, trifluor ecetsav (TFA) Negatív ion üzemmódban: Savas vegyületek Növeljük a pH-t (ammónium hidroxiddal) Semleges vegyületek: töltés csere, APCI (később…)

9 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI –adduktok pozitív módban Addukttömegtöltés M+3HM/3 + 1.0072763+ M+2H+NaM/3 + 8.3345903+ M+H+2NaM/3 + 15.76619043+ M+3NaM/3 + 22.9892183+ M+2HM/2 + 1.0072762+ M+H+NH4M/2 + 9.5205502+ M+H+NaM/2 + 11.9982472+ M+H+KM/2 + 19.9852172+ M+ACN+2HM/2 + 21.5205502+ M+2NaM/2 + 22.9892182+ M+2ACN+2HM/2 + 42.0338232+ M+3ACN+2HM/2 + 62.5470972+ M+HM + 1.0072761+ M+NH4M + 18.0338231+ M+NaM + 22.9892181+ M+CH3OH+HM + 33.0334891+ Addukttömegtöltés M+KM + 38.9631581+ M+ACN+HM + 42.0338231+ M+2Na-HM + 44.9711601+ M+IsoProp+HM + 61.065341+ M+ACN+NaM + 64.0157651+ M+2K-HM + 76.9190401+ M+DMSO+HM + 79.021221+ M+2ACN+HM + 83.0603701+ 2M+H2M + 1.0072761+ 2M+NH42M + 18.0338231+ 2M+Na2M + 22.9892181+ 2M+3H2O+2H2M + 28.023122+ 2M+K2M + 38.9631581+ 2M+ACN+H2M + 42.0338231+ 2M+ACN+Na2M + 64.0157651+

10 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI – adduktok negatív módban Addukttömegtöltés M-3HM/3 - 1.0072763- M-2HM/2 - 1.0072762- M-H2O-HM- 19.018391- M-HM - 1.0072761- M+Na-2HM + 20.9746661- M+ClM + 34.9694021- M+K-2HM + 36.9486061- M+FA-HM + 44.9982011- M+Hac-HM + 59.0138511- M+BrM + 78.9188851- M+TFA-HM + 112.9855861- 2M-H2M - 1.0072761- 2M+FA-H2M + 44.9982011- 2M+Hac-H2M + 59.0138511- 3M-H3M - 1.0072761-

11 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna APCI aeroszol képzés; oldószer mentesítés (hőátadással); hatékony ionizálás (nagyfeszültségű kisülésű tű 5-10kV; 1-5mA); Komplementere az elektrospraynek, alternatív ionizálási lehetőség. Nagy érzékenység, robusztusság jellemzi és alkalmazható a hagyományos áramlási sebességeknél.

12 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna APCI

13 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna APCI

14 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna APPI Alkalmazott doppánsok (Toluol, Aceton) 1.APCI-hoz hasonlóan elporlasztjuk az eluenst fűthető ionforrásban. 2.Az ionforrásba bejuttatunk ún. doppáns vegyületet. 3.UV sugárzás hatására ionizálódnak a doppáns molekulák és ún. „fotoionok” jönnek létre. 4.A fotoionok ion-molekula láncreakciókat iniciálnak, amely során létrejönnek az ionizált molekulák [MH]+ formában (proton transzfer) vagy [M]+ (töltés transzfer).

15 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Mintabevitel API-MS-be Infúzó Folymatos mintaáram Flow Injection Analysis (FIA) Eluensbe injektált minta elválasztás nélkül Elválasztást követően HPLC Kapilláris elektroforézis

16 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI-APCI és a HPLC Operates from 1 - 1000 µL/min Compatible with: 1.0, 2.1, 3.0and 4.6 mm i.d. columns 2.1 mm i.d. column is popular choice Concentration sensitive Compatible with reversed-phase solvents Operates from 200 - 1500 µL/min Compatible with: 4.6, 3.0, and 2.1 mm i.d. columns 4.6 mm i.d. column is popular choice Not concentration sensitive Use with reversed- and normal- mobile phases APCI -Electrospray

17 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna ESI, APCI és a HPLC

18 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Product Ion Scan (PIS) Select Precursor Ion Scan Products Collision m1+m1+ m2+m2+ m2+m2+ m2+m2+ m 1 molekula fragmens spektruma m 1 + set m 2 + scan 1 kvadrupólusÜtközési cella (Q2) 3 kvadrupólus QQQ

19 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna MS/MS - Precursor Ion Scan QQQ

20 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna MS/MS Constant Neutral Loss QQQ

21 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna (M+X) + - 2hydrogen molecule (M+X) + - H 2 (M+X) + - 18water (M+X) + - H 2 O (M+X) + - 20hydrogen fluoride (M+X) + - HF (M+X) + - 28CO or ethylene (M+X) + - CO or (M+X) + - C 2 H 2 (M+X) + - 30formaldehyde (M+X) + - H 2 CO (M+X) + - 31methylamine (M+X) + - CH 3 NH 2 (M+X) + - 32ethanol (M+X) + - CH 3 CO 2 H (M+X) + - 36hydrogen chloride (M+X) + - HCl (M+X) + - 44carbon dioxide (M+X) + - CO 2 (M+X) + - 46nitrogen dioxide (M+X) + -NO 2 (M+X) + - 60acetic acid (M+X) + - CH 3 CO 2 H (M+X) + - 90Silanol (M+X) + - HO-Si-(CH 3 ) 3

22 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Multiple Reaction Monitoring (MRM) Molekulaion szűrése Fragmens ion szűrése Fragmentáció QQQ


Letölteni ppt "Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1."

Hasonló előadás


Google Hirdetések