Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

WIREC Alkalmazott gázkromatográfia III. 2008. Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kht.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "WIREC Alkalmazott gázkromatográfia III. 2008. Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kht."— Előadás másolata:

1 WIREC Alkalmazott gázkromatográfia III Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kht.

2 Amiről szó lesz  Az alkalmazás körülményei  Gyógyszeranalitikai alkalmazások  Élelmiszeranalitikai alkalmazások  Környezetanalitikai alkalmazások WIREC

3 A mai nap programja Környezetanalitikai alkalmazások SVOC halogénezett vegyületek ASE Élelmiszeranalitikai alkalmazások Toxinok Koleszterin Zsírsavak Peszticidek WIREC

4 Környezetanalitika SVOC halogénezettek  PCB-k  Klórbenzolok (tri-, tetra-, penta-, hexa-)  Klórozott peszticidek WIREC

5 Környezetanalitika SVOC halogénezettek Mérési lehetőségek GC-MS ECD-ECD konfirmációs analízis WIREC

6 Környezetanalitika SVOC halogénezettek WIREC ECD-A + ECD-B 1.Rt 2.RI 3.RI-A és RI-B 4.RA-A és RA-B Konfirmációs analízis Megbízhatósági szintek

7 Környezetanalitika SVOC halogénezettek Mérési körülmények:  Detektor1: ECD  Detektor2: ECD  Vivőgáz: hidrogén  Nyomásprogram: 180 kPa (1 perc), 116 kPa (1 perc), 3,5 kPa/min 220 kPa-ig  Kolonna1: Supelco SPB-Octyl (60 m x 0,25 mm x 0,25 µm)  Kolonna2: Supelco MDN-5S (60 m x 0,25 mm x 0,25 µm)  Hőmérséklet program: 50 °C (2 perc), 8 °C/min 240 °C-ig, 30 °C/min 280°C-ig (2perc)  Injektálás: splitless, 2 µl  Injektor hőmérséklet: 280 °C  Detektor hőmérséklet: 300 °C WIREC

8 Környezetanalitika SVOC halogénezettek WIREC PCB standard kromatogramja

9 Környezetanalitika SVOC halogénezettek PCB Arochlor 1260 (Restek) WIREC

10 ASE DIONEX Accelerated Solvent Extraction WIREC

11 ASE WIREC Működés Extrakciós idők összevetése Soxhlet 4–48 h Automata Soxhlet 1–4 h Ultrahang segített extrakció0,5–1 h SFE 0,5–2 h Mikrohullámú extrakció0,5–1 h ASE 150/350 cella clean-uppal 0,2–0,3 h Oldószer szükségletek Soxhlet 150–500 mL Automata Soxhlet 50–100 mL Ultrahang segített extrakció150–200 mL SFE 5–50 mL Mikrohullámú extrakció 25–50 mL ASE 150/350 5–200 mL

12 ASE WIREC Alkalmazások

13 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC Trichotecének Diacetoxyscirpenol (DAS) T2 toxin (T2) Deoxynivalenol (DON) Nivalenol (NIV)

14 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC TLC Immunkémiai módszerek pl.: ELISA RIA HPLC GC Trichotecének – mérési módszerek

15 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC Trichotecének gázkromatográfiás meghatározása trifluoracetil- (TFA) pentafluorpropionil- (PFP) Heptafluorbutiril- (HFB) Hexametil-diszilazán (HMDS) Trimetil-klór-szilán (TMCS) N,O-bisz(trimetilszilil)-acetamid (BSA) N,O-bisz(trimetilszilil)-trifluor-acetamid (BSTFA) N-Trimetilszilil-imidazol (TMSI) SzármazékképzésselSzármazékképzés nélkül Trimetilszilil-származékok Acil-származékok

16 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC Trimetilszilil-N,N-dimetil-karbamát Reakció alkoholokkal, fenolokkal és karbonsavakkal: Trichotecének - származékképzés

17 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC 1 g (NH 4 ) 2 SO 4 0,3 g diatomaföld 1,8 g aluminium- oxid 0,3 g aktív szén 0,5 g C18 mosás 8 ml acetonitrillel, majd 8 ml AcN - H 2 O-val (84:16) 4 ml minta felvitele 2. Tisztítás: eluálás 8ml AcN - H 2 O-val (84:16) a mintafelvitel és az elúció során gyűjtött oldat bepárlása max. 70ºC-on levegő- áramban 1. Extrakció: 25 g minta, 100 ml AcN - H 2 O (84:16), 30 perc rázás, szűrés redős szűrőn 3. Származékképzés: 75 µl hexános belső standard oldatban, 75 µl szililezőszerrel szobahőmérsék- leten 50 percig állni hagyjuk Trichotecének - Mintaelőkészítés

18 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC Trichotecének – Mérési körülmények Vivőgáz: Hidrogén (fejnyomás: 20 kPa Injektor: on column; 220  C Oszlop: SPB-1 15 m x 0,53 mm ID, 0,10  m filmvastagság (Supelco Inc.) Detektor: FID, 260  C, Make up gáz: Nitrogén (4.6), 30 cm3/perc Hőmérséklet program: 120  C (1 perc), 6  C/perc, 150  C (4,5 perc), 6  C/perc, 180  C, 10  C/perc, 240  C (10 perc)

19 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC GC-FID Kukorica dara, 1 mg/kg

20 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC Trichotecének - konfirmáció A gázkromatográf típusa: Agilent 6890N Vivőgáz: Hélium (5.0), 38 cm/sec Injektor: splitless; 270  C; valve time: 0,70 perc Oszlop: HP-5 30 m x 0,25 mm ID, 0,25  m Detektor: Agilent 5973 MSD, SIM üzemmód Hőmérséklet program: 50  C (0 perc), 30  C/perc, 150  C (0 perc), 8  C/perc, 300  C (5 perc) Belső standard oldat: 13,16  g/ml n-dokozán hexánban Injektált mennyiség: 1µl

21 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC GC-MS Kukorica dara, 1 mg/kg

22 Élelmiszeranalitika Toxinok WIREC FID MSD Kimutatási határ (mg/kg) 0,370,330,310,47 0,30 0,200,05 Ismételhetőség (RSD%) 24,1521,4118,5520,14 11,9822,198,6912,53 Visszanyerés (%) 89,9872,30109,2472,30 91,9276,0992,6181,48 Linearitás (R) 0,99230,99490,99800,9970 0,98700,97830,97430,9754 Trichotecének - A módszer jellemzése

23 Élelmiszeranalitika Koleszterin WIREC

24 Élelmiszeranalitika Koleszterin WIREC Minta-előkészítés Darálás 30 perc reflux 1:1 HCl-oldattal Hűtés mellett átlúgosítás KOH-dal 45 perc reflux 100 cm 3 metanollal Extrakció petroléter-dietiléter 4:1 eleggyel Szárítás Na 2 SO 4 -on Szárazra párlás 40°C-on Oldás 5 cm 3 dimetil-formamidban

25 Élelmiszeranalitika Koleszterin Származékolás  bisz-Trimetilszilil-trifluor-acetamid származékoló szer  Reakció 80°C-on 40 percig 1:1 arányban hozzáadott BSTFA-val  500 µl n-hexán majd 2 cm 3 víz hozzáadása, összerázása  Hexános fázis injektálása GC-MS-be WIREC

26 Élelmiszeranalitika Koleszterin Mérési körülmények  Vivőgáz: hélium, konstans flow: 38 cm/sec  Kolonna: HP-5MS (30 m x 0,25 mm x 0,25 µm)  Hőmérséklet program: 120ºC (0 perc), 20 ºC/min 220 ºC-ig (0perc), 8 ºC/min 300 ºC-ig (10perc)  Injektálás: 2 µl, split (splitarány:10:1)  Injektor hőmérséklet: 300 ºC  Transzferline hőmérséklete: 300ºC  Ionforrás hőmérséklete: 230ºC, Quadrupol hőmérséklete: 150ºC  Analizis mód: Szelektív ionkövetés (SIM: koleszterin: 129, 329, 368, 458; kolesztanol SSTD: 215, 216, 355, 445, 460, PCB 209 ISTD: 495, 498, 500, 502)  QL: 1mg/kg WIREC

27 Élelmiszeranalitika Koleszterin GCMS kromatogram WIREC

28 Élelmiszeranalitika Koleszterin Koleszterin fragmentogram WIREC

29 Élelmiszeranalitika Koleszterin Kolesztanol ISTD fragmentogram WIREC

30 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Keresett zsírsav mennyiségi meghatározása gyógytermékek, ill. erukasav Termékre jellemző zsírsav arányok meghatározása különböző típusú étolajok

31 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC vajsavC4:0linolsavC18:2n6c kapronsavC6:0arachidsavC20:0 kaprilsavC8:0gamma-linolénsavC18:3n6 kaprinsavC10:0eikozénsavC20:1 undekánsavC11:0linolénsavC18:3n3 laurinsavC12:0heneikozanonsavC21:0 tridekansavC13:0eikozadienonsavC20:2 mirisztinsavC14:0behénsavC22:0 mirisztilsavC14:1cis-eikozatrienonsavC20:3n6 pentadekánsavC15:0erukasavC22:1n9 cis-pentadekánsavC15:1eikozatrienolsavC20:3n3

32 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC palmitinsavC16:0arachidonsavC20:4n6 palmitolsavC16:1trikozanonsavC23:0 heptadekánsavC17:0dokozadienonsavC22:2 cis-heptadekánsavC17:1lignocerinsavC24:0 sztearinsavC18:0eikozapentanonsavC20:5n3 elaidinsavC18:1n9tnervonsavC24:1 olajsav C18:1 n 9 c dokozahexanonsavC22:6n3 transz-linolsavC18:2n6t

33 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Mintaelőkészítés  Szabad zsírsavak metilészteresítése  30 perc reflux metanol – cc.kénsav eleggyel  Visszahűtés után kisózás NaCl-dal  Extrakció n-hexánnal  Extrakt savmentesítése vizes mosással  Extrakt szárítása Na 2 SO 4 -on  Bepárlás 2-3 cm 3 -re

34 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Mérési körülmények  Vivőgáz: hidrogén, konstans flow: 50 cm/sec  Kolonna: Omegawax (30 m x 0,25 mm x 0,20 µm)  Hőmérséklet program: 50ºC (2 perc), 4 ºC/min 220 ºC-ig (20perc)  Injektálás: 2 µl, splitless  Injektor hőmérséklet: 250 ºC  FID hőmérséklete: 260ºC

35 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Standard kromatogram

36 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Napraforgó étolaj kromatogram

37 Élelmiszeranalitika Zsírsavak WIREC Új utak Technikailag - GC x GC (Dean switch) Feladatok - Zsírsav alapú meghatározás idegrendszeri szövet kimutatására feldolgozott hústermékekben (szivacsos agyvelőgyulladás)

38 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Feladat  Jellemzően µg/kg nagyságrendben meghatározni a szermaradékokat a legkülönbözőbb élelmiszerekben / alapanyagokban.  Célvegyületek  ~ bejegyzett hatóanyag a világon  ~3-400 elvárt (területre, kultúrára jellemző)

39 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Analitikai lehetőségek  Összetett mintaelőkészítés – elágazó analitika (LC-MS-MS, GC-k szelektív detektorokkal)  Univerzális, gyors mintaelőkészítés – minimalizált analitikai lépések (LC-MS-MS, GC-MS)

40 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Összetett előkészítés, elemzés

41 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Keverőbabás extrakció  Nagyhatékonyságú és szelektív dúsítás  Gyors és egyszerű mintaelőkészítés  Alacsony gépidő-szükséglet  Fejleszthető kiértékelés  SCAN üzemmódban mérhetünk ppb koncentrációkat Csak azokra a növényvédő-szerekre alkalmazható melyeknél lgKow>2 Alacsony zsírtartalmú mátrixokra

42 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Keverőbabás extrakció (Twister®)  Nagyhatékonyságú és szelektív dúsítás  Gyors és egyszerű mintaelőkészítés  Alacsony gépidő-szükséglet  Fejleszthető kiértékelés  SCAN üzemmódban mérhetünk ppb koncentrációkat Csak azokra a növényvédő-szerekre alkalmazható melyeknél lgKow>2 Alacsony zsírtartalmú mátrixokra

43 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Méréstechnikai háttér MPS2 mintaadagoló TDU termodeszorber CIS injektor GC-MS mérőrendszer

44 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Minta-előkészítés Aprítás, pürésítés Metanolos extrakció Ultracentrifugálás

45 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Az üveg keverőbaba felületére PDMS megosztófázist visznek fel 0,5-1 mm rétegben, ez a Twister. A minta extraktumot a Twisterrel kevertetve kiextraháljuk a vizsgálandó komponenseket az oldatból. A CIS injektor fölé szerelt Twister deszorpciós egységben (TDU) a Twisterről lefűtjük az abszorbeált komponenseket. Keverőbabás extrakció Stir Bar Sorptive Extraction, Twister©

46 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC TDU CIS GC-MS T T T Termodeszorpció

47 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Twister – 3 ppb foszforsavészter narancsban

48 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Twister – 3 ppb foszforsavészter narancsban

49 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC Twister - teljesítmény Vizsgált mátrixok: Retek bio Alma Narancs Burgonya 8,5 % 12,0 % 10,9 % 8,3 % Átlag RSD% három mérés alapján 15 ppb

50 Élelmiszeranalitika Peszticidek WIREC TIC & Spectrum Deconvoluted peaks and spectra TIC Component 1 Component 2 Component 3 Deconvolution matrix target interference Kiértékelés mátrix dekonvolúcióval


Letölteni ppt "WIREC Alkalmazott gázkromatográfia III. 2008. Rikker Tamás WESSLING Nemzetközi Kutató és Oktató Központ Kht."

Hasonló előadás


Google Hirdetések