Drén előzetes verzió 1 A fertőző bronchitiszről: másként mint mások (UTOLSÓ ELŐTTI) Dr. Drén Csaba az áo. tud. kandidátusa MSD szamai napok 2014. április.

Az előadások a következő témára: "Drén előzetes verzió 1 A fertőző bronchitiszről: másként mint mások (UTOLSÓ ELŐTTI) Dr. Drén Csaba az áo. tud. kandidátusa MSD szamai napok 2014. április."— Előadás másolata:

1 Drén előzetes verzió 1 A fertőző bronchitiszről: másként mint mások (UTOLSÓ ELŐTTI) Dr. Drén Csaba az áo. tud. kandidátusa MSD szamai napok 2014. április 10

2 Drén előzetes verzió 1 DOMESTICATION Red Junglefowl (Gallus gallus) Wikipedia) Grey Junglefowl (Gallus sonneratii) From Ton Schat, with permission EXTENZIV HUSBANDRY mMDV INTENSIVE HUSBANDRY vvMDV, vv + MDV vMDV (Marek, 1907, 1926-29) From Wiebe van der Sluis with permission DUST+MBV

3 Drén előzetes verzió 1 BALTIMORE FÉLE VIRUS CSOPORTOSITÁS IBV BEVEZETÉS EGY KIS VIROLÓGIA 1. IBV

4 Drén előzetes verzió 1 IBV BEVEZETÉS EGY KIS VIROLÓGIA 2. TAXONOMY Group IV: egyszálú burkos RNS virus (ssRNA)Group IV: egyszálú burkos RNS virus (ssRNA) Order:NidoviralesFamily: CoronaviridaeCoronaviridae Family: CoronavirinaeCoronavirinae Genus: Gammacoronavirus SPECIES Type:Avian coronavirus Burkos, ~ 120 nm átmérőjű Irodalom: Neuman BW et al. Neuman BW et al. AZ S FEHÉRJE KÉT GLIKOPROEINBŐL ÁLL: S1 ÉS S2 (~ 520 ÉS 625 AMINÓSAV). S1 ELLEN TEMLŐDNEK HAG ÉS VN ELLENANYAGOK. M fehérje 10%-a jelenik meg a felületen

5 Drén előzetes verzió 1 VIRUS REPLIKÁCIÓ ADSZORPCIÓ (SEJTECEPTOR S1 KAPCSOLAT) PENETRÁCIÓ/MEMBRÁN FÚZIÓ SZERKEZETI ( S1-S2, M, E, N) ÉS KISEGITŐ FEHÉRJÉKET KÓDOLÓ RNS SZINTÉZIS (REKOMBINÁCIÓS LEHETŐSÉG, VIRULENCIA ?) VIRIONOK KIALAKULÁSA ENDOPLAZMÁS RETIKULUMBAN BIMBÓZÁS ÉS FELHALMOZÓDÁS (??) UTÓDVIRUSOK ~ 3-4 ÓRA UTÁN (MAX. > 12 ÓRA MULVA) IBV KÉSLELTETI A PROGRAMOZOTT SEJTHALÁLT (AUTOPHAGIA!) T0BB VIRUS KELETKEZIK (!)

6 Drén előzetes verzió 1 IBV RNS REPLIKÁCIÓ VÁZLATOSAN

7 Drén előzetes verzió 1 EGY KIS VIROLÓGIA : vírus-sejt kölcsönhatás eredménye Autophagia: növeli a sejt túlélését (virus szaporodást (IBV nsp6 fehérje) Programozott sejthalál késleltetése: több vírus keletkezik (replikáció végén). Sejtciklus módosítása: vírus replikációnak kedvez (több vírus keletkezhet)

8 Drén előzetes verzió 1 SZÖVET-SEJT TROPIZMUS: MI HATÁROZZA MEG ?? HÁMSEJTEK (α 2,3-SZIÁLSAV) –Légutak –Reprodukciós szervek (Petevezető) –Vese EMÉSZTŐ CSATORNA (BELEK!, VAKBÉL TÜSZŐK- PERZISZTENCIA) –NINCS NYILVÉNVALÓ KÓROS TÜNET!! MÁS SZERVEK (QX? ) IMMUNRENDSZER (Harder mirigy stb) A GENOM SZERKEZETI ÉS NEM STRUKTÚR GÉNJEINEK A SZEREPE

9 Drén előzetes verzió 1 CÉLSEJTEK A LÉGÚTBAN SEM image of tracheal epithelium Courtesy of Prof. S.Beck www.sunynassau.edu TEM image of tracheal epithelium, cross-section IBV

10 Drén előzetes verzió 1 VARIÁNSOK KIALAKULÁSA ANTIGÉN SHIFT & DRIFT IBV GENOM REKOMBINÁCIÓJA KEVERT FERTŐZÉS ESETÉN

11 Drén előzetes verzió 1 VARIÁNSOKRÓL BŐVEBBEN VÁRATLANUL ÉS GYAKRABBAN JELLENNEK MEG HATÉKONYABBAN AZONOSITHATÓK ENDÉMIÁSAK VAGY PANDÉMIÁSAK ?? KLINIKAI ÉS SUBKLINIKAI FORMA

12 Drén előzetes verzió 1 SZEROTIPUS- GENOTIPUS-PATHOTIPUS BEVEZETÉS HOGYAN JUT BE A SZERVEZETBE ? HOGYAN JUT BE A CÉLSEJTBE ? CÉLSEJTEK - CÉLSZERVEK VIRUS REPLIKÁCIÓ SZEROTIPUS- GENOTIPUS-PATHOTIPUS IMMUNVÁLASZ DIAGNOSZTIKA SZEROLÓGIA – MOLEKULÁRIS DIAGNOSZTIKA

13 Drén előzetes verzió 1 A BAROFIAK LÉGZŐRENDSZER KISMÉRETŰ TÜDŐ ( 2% ) Légzsákok 4 PÁR LÉGZSÁK + 1 PÁRATLAN (felülete ~10X nagyobb, eltérés fajok között) LÉGCSERE HELYE ALVEOLUSOK HELYETT PARABRONHUSOKBAN

14 Drén előzetes verzió 1 A PARABRONUSOK ANATÓMIÁJA: HOL LEHET AZ IBV?

15 Drén előzetes verzió 1 HOL JUT BE A SZERVEZETBE AZ IBV? LÉGCSŐGYULLADÁS TÜDŐGYULLADÁS LÉGZSÁKGYULLADÁS IBV PATOLÓGIA

16 Drén előzetes verzió 1 CÉLSEJTEK A LÉGÚTBAN SEM image of tracheal epithelium Courtesy of Prof. S.Beck www.sunynassau.edu TEM image of tracheal epithelium, cross-section IBV

17 Drén előzetes verzió 1 HARDER MIRIGY VAR ά-NDV mAbs FIRST RSULTS Fig.1. D1 Harderian-gland cryo section treated with 4D6 mAb (AVINEW vaccinated) 200x. Positive signal is located in the alveolar lacrima secreting cells ( ) Fig.2 Consecutive section of Fig.1. a-IgY- heavy chain (S. Biotech) 400x. Strong reaction in the interstitial tissue ( ). Ducts in the gland ( ) lined with alveolar cells wich arc shown bellow. Ducts of the gland ( ) lined with alveolar cells showing + reaction in Fig.1. ( ) Interstitial tissue showing + reaction in Fig.2 ( ) Lymphocytic and histiocytic infiltration in the interstitial tissue. H.-E. 200x ( ). This could be recognised in Fig. 2. as small IgY pe cells ( )

18 Drén előzetes verzió 1 Szövet-sejt tropizmus: mi határozza meg?? Sejten belűli replikáció Adszorpció-receptor(ok) Replikációs mechanizmus Rekombinációs lehetőség Homológ interferencia, heterológ nincs vagy nem hatékony

19 Drén előzetes verzió 1 VIRÉMIA: SEJTES VAGY SEJTMENTES SZÖVET-SEJT TROPIZMUS HOGYAN JUT EL A VIRUS A VÉRBE? SEJTES (MAKROPHÁGOK, LYMPHOID SEJTEK??) SEJTMENTES FORMA PERZISZTENCIA (VESE, VAKBÉL TÜSZŐK) KORAI FERTŐZŐDÉS IDŐPONTJA FONTOS (IMMURENDSZER “ÉRÉSE”)

20 Drén előzetes verzió 1 http://people.eku.edu/ritchisong/avianreproduction.html Reprodukciós szervek neurohormonális szabályozása (TOJÁSTERMLÉSRE KIFRJTETT HSATÁS)

21 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV

22 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV ÉS AZ IBV KÖLCSÖNHATÁSA Infundibulum IBV ±

23 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV ÉS AZ IBV KÖLCSÖNHATÁSA IBV 4+ Neonatális fertőzés: “áltojók” Magnum

24 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV ÉS AZ IBV KÖLCSÖNHATÁSA Isthmus MEMBRÁNOK TERMELÉSE IBV +

25 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV ÉS AZ IBV KÖLCSÖNHATÁSA Uterus MÉSZHÉJ KIALAKULÁSA PIGMENT TERMELÉS IBV +

26 Drén előzetes verzió 1 A NŐI IVARSZERV ÉS AZ IBV KÖLCSÖNHATÁSA IBV kritikus: Tojásrakás indulásaaskor (19 - 22 hetes kor!!) ezután csökken Neonatális kor (tojócső nem fejlődik ki) Vagina

27 Drén előzetes verzió 1 Diagram of the Cloaca of a Bird BF...... Bursa of Fabricius (Bursa Fabricii) ; CD...... Coprodaeum ; UD...... Urodaeum ; PD...... Proctodaeum R...... Rectum ; u...... Ureter ; v.d...... Vas deferens Hol van az IBV ?

28 Drén előzetes verzió 1 IBV ÉS A VESÉK KAPCSOLATA A VIZELET A VESÉKBŐL A KOLAKÁBA JUT (KOPRODEUM!). VESE-CLOAKA KAPCSOLATA (VIRUSÜRITÉSÜ- LATENCIA)

29 Drén előzetes verzió 1 EGY KIS IMMUNOLÓGIA ANTIGÉN PREZENTÁCIÓ ALAPJAI

30 Drén előzetes verzió 1 EGY KIS IMMUNOLÓGIA folytatás IMMUNVÁLASZ TERMÉSZETES (ÖRÖKLÖTT ) SZERZETT v. AKTIV IMMUNITÁS HUMORÁLIS SEJTES LOKÁLIS (HARDER + ?) IMMUNSZUPRESSZIÓ ?

31 Drén előzetes verzió 1 IMMUNVÁLASZT BEFOLYÁSOLÓ ESEMÉNYEK AZ ANTIGÉN BEMUTATÁS SZEREPE HARDER MIRIGY SZEREPE (LOKÁLIS- IgA HATÁSA) 0R0KL0TT IMMUNVÁLASZ (GENTIKAI REZISZTENCIA ?) ELSŐDLEGES HUMORÁLIS (IgM-IgY-IgA) SEJTES (CTL, NK stb. DE ???) MÁSODLAGOS DIREKT IMMUNSZUPRESSZIV HATÁS ? (E.COLI stb. ) Ó IMMUNSZUPPRESSZIV VIRUSOK HATÁSA (CS0KKENT IgA TERMELÉS (CAV & IBDV)

32 Drén előzetes verzió 1 EGY KIS SZEROLÓGIA KLASSZIKUS SZEROTIPUSOK (1960-1970) VARIÁNSOK MEGJELNÉSE (USA, AUSTRALIA, ASIA EU) EMBRIONÁLT CSIRKE (PULYKA) TOJÁS HASZNÁLATA IBV HAEMAGGLUTINÁLÓ KÉSZSÉGE SZEROLÓGIAI MÓDSZEREK KIFEJLESZTÉSE (VNT, TRACHEA GYŰRŰ, SZÖVETTENYÉSZET) SZEROTIPUS SPECIFIKUS PRÓBÁK KORLÁTJA (KORAI IMMUNVÁLSZ ESTÉN MEGBIZHATÓK) MÁSODLAGOS IMMUNVÁLASZ ESETÉN KESZTREAKCIÓK LEHETNEK

33 Drén előzetes verzió 1 MONOKLÓNÁLIS ELLENANYAGOK SZEREPE S1 EPITÓPOK AZONOSITSÁRA ALKALMAS (SZEROTIPUS SPECIFIKUS)

34 Drén előzetes verzió 1 MOLEKULÁRIS DIAGNOSZTIKA BEVEZETÉS MOLEKULÁRIS DIAGNOSZTIKA

35 Drén előzetes verzió 1 NUKLEINSAV ALAPÚ DIAGNOSZTIKA. TELJES GENOM SZEKVENCIA (BEAUDETTE STRAIN (12) S1 GÉN VARIÁBILIS RÉSZE ÉS A PROTEKTIV IMMUNITÁS S1 VÁLTOZÁS ÉS A PROTEKTIV IMMUNITÁS (DE VAN KERESZTVÉDELEM: ANTIGÉN PRESZENTÁCIÓ SZEREPE) S1 AMINÓSAV ELTÉRÉS MÉRTÉKE (20-48% LEHET, VNT) NÉHÉNY S1 EPITÓP INDUKÁL VN ELLENANYAGOT (SZEROTIPUS GENOTIPUS ELTÉRÉS MAGYARÁZATA) NEHEZEN REPRODUKÁLHATÓ MÓDSZEREK (VNT SZEKVENÁLÁS) A KERESZTVÉDELEM ÉS AZ S1 SZEKCVENCIA KÜLÖNBSÉGEK FORDITOTTAN ARÁNYOS S1 GÉN ÉS A TÖBBI GÉN KÖZÖTTI KAPCSOLAT (KERESZTVÉDELEM, ANTIGÉN PREZENTÁCIÓ!) VARIÁNSOK KIALKULÁSA (REKOMBINÁCIÓ +)

36 Drén előzetes verzió 1 VIRUSÜRITÉS ?? LÉGÚTI VÁLADÉK? BÉLSÁR PERZISZTENCIA: LYMPHOID NEM LYMPHOID SEJTEKBEN?? EGYES IZOLÁTUMOK SZÉLES KÖRBEN ELTERJEDTEK MÁSOK MIÉRT NEM? MÁS MADÁRFAJOK REZERVOÁR SZEREPE KÉTSÉGES NEM ISMERT TULAJDONSÁGOK SZEREPE (PL. NEM SZERKEZETI FEHÉRJÉK) VIRUS RESZISZTENCIA, VIRULENCIA, PATHOGENESIS, VIRUSÜRITÉS (LÉGUTI VÁLADÉKKAL, BÉLSÁRRAL; VÉDKEZÉS ALAPJA: HATÉKONY VAKCINÁZÁS

37 Drén előzetes verzió 1 Diagram of the Cloaca of a Bird BF...... Bursa of Fabricius (Bursa Fabricii) ; CD...... Coprodaeum ; UD...... Urodaeum ; PD...... Proctodaeum R...... Rectum ; u...... Ureter ; v.d...... Vas de ferens http://www.thewonderofbirds.c om/biology/cloaca.htm Hol van az IBV ?

38 Drén előzetes verzió 1 MINTAVÉTEL (EPISCOPE!) IDEJE HELYE (RT-PCR ÉS SZEKVENÁLÁS ÉRZÉKENYSÉGE) MÓDJA: SZÖVET VAGY TAMPON LÉGÚTI: ORR, LÉGCSŐ HEVENY SZAKASZBAN VÁLADÉK? EMÉSZTŐ CSATORNA: + VESE TAMPON VAGY SZÖVET: (NEPHROPATHOGÉN, VAGY TOJAS TEMELÉSI PROBLÉMA ESETÉN) BÉLSÁR: ?? PERZISZTENCIA: VESÉK, VAKBÉL TÜSZŐK SZÁRAZ FTA PAPÍR: RT-PCR VIZSGÁLAT

39 Drén előzetes verzió 1 Védekezés más előadók JAVASOLT IRODALOM: The long view: 40 years of infectious bronchitis research, Jane K. A. Cook1, M. Jackwood2* and R. C. Jones3, Avian Pathology (June 2012) 41(3), 239250 de Wit, J.J. (2000). Technical Review. Detection of infectious bronchitis virus. Avian Pathology, 29, 7193. de Wit, J.J., Cook, J.K.A. & van der Heijden, H.M. (2011). Infectious bronchitis virus variants: a review of the history, current situation and control measures. Avian Pathology, 40, 223,235.

40 1. kérdés Mi okozza a variánsok (IBV) kialakulását? 1.A1: mutáció 2.A2: rekombináció 3.A3: mindkettő Drén előzetes verzió 1

41 2. Kérdés Miért nem azonos a szerotipizálás éredménye a szekvenálásból származó eredménnyel? 1.A1: A két módszer eltérő érzékenysége miatt 2.A2: A vírus genom eltérő részére vonatkozik az eredmény 3.A3: nem tudjuk Drén előzetes verzió 1

42 3. Kérdés Mikor kell szerológiai vizsgálatra mintát venni 1.A1: Az első klinikai tünetek megjelenésekor 2.A2: A klinikai tünetek megjelenése után 10 nappal 3.A3: minkét időpontban Drén előzetes verzió 1

43 4. kérdés Mikor célszerű mintát venni vírus kimutatásra ? 1.A1: bármikor, de minimum az állomány 10%-ból (tampon, és szervminta) 2.A2: heveny szakaszban a felső légútból (tampon és szervminta) 3.A3: a heveny szakasz után az emésztő csatornából (tampon vagy szervminta) Drén előzetes verzió 1