Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

DNA-Fingerprint1 A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat. DNA-Fingerprint2 A munkacsoportok kémcsövei.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "DNA-Fingerprint1 A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat. DNA-Fingerprint2 A munkacsoportok kémcsövei."— Előadás másolata:

1 DNA-Fingerprint1 A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat

2 DNA-Fingerprint2 A munkacsoportok kémcsövei

3 DNA-Fingerprint3 Suspect 1 – 5 Tubes contain 10 µl of DNA sample 70 µl Enzyme mix 0,24 g Agarose 10 µl Marker 80 µl Loading buffer 10 µl CS DNA

4 DNA-Fingerprint4 1. A minták előkészítése

5 DNA-Fingerprint5 Figyelem! •Minden pipettázáshoz használjunk új pipetta csúcsot a szennyeződés elkerülésére. •Mindegyik csövet zárjuk le és legkevesebb 30 mp-ig keverjük (rázzuk)..

6 DNA-Fingerprint6 1. A DNS minták csövei DNA 10µl CS S 1 S 2 S 3 S 4S 5 10µl

7 DNA-Fingerprint7 1.1 Pipettázzunk 10 ul enzimkeveréket mindegyik csőbe DNA 10µl CS S 1 S 2 S 3 S 4S 5 10µl Enzyme- 10µl10µl 10µl 10µl 10µl 10µl (ENZ)

8 DNA-Fingerprint8 2. A minták fermentálása Tegyük a csöveket a vízfürdő állványba és inkubáljuk 20 percig 37 °C-os vízfürdőben.

9 DNA-Fingerprint9 3. Készítsük elő a gélelektroforézist

10 DNA-Fingerprint10 Helyezzük bele a kamrába a szánt, a fém pálcákat(elektródákat) és a fésűt. 3.1 Készítsük el az elektroforézis kamrát Metal rods Sledge Comb

11 DNA-Fingerprint Készítsük el a géleket (0,8%) •Adjunk 0,24 g agarózhoz + 30 ml TAE- puffert egy 250 ml-es Erlenmeyer lombikba. •Melegítsük az Erlenmeyer lombikot rövid ideig a mikrohullámú sütőben, keverjük meg és melegítsük újra rövid ideig.

12 DNA-Fingerprint A kamra feltöltése a géllel Öntsük az 55 °C-os gélt a géltartóba. Figyelem: •Ellenőrízzük a hőmérsékletet a kézfejünk hátával. •Ne mozgassuk a gélt amíg nem szilárdul meg.

13 DNA-Fingerprint Az elektroforéziskamra elkészítése •Miután a gél megszilár- dult, tegyük fel az elektroforéziskamra elektródáit. •Töltsük fel a kamrát 270 ml TAE-pufferrel, hogy elfedje a gélt. •Távolítsuk el a fésűt.

14 DNA-Fingerprint14 4. A DNS jelölő elkészítése Pipettázzunk 10 µl töltő puffert (LB) into a10 µl DNS-jelölőbe(M).

15 DNA-Fingerprint µl töltő puffer hozzáadás Pipettázzunk 10 –t a töltő pufferből a CS-be és az S1 –S5 csövekbe. 10 µl

16 DNA-Fingerprint16 Pipettázzunk 20 µl-t minden mintából és 20 µl-t a DNS jelölőből (marker) (M) a résekbe. 6. A mélyedések feltöltése Emlékezz a sorrendre! Sávok:töltsd balról jobbra A bal sáv szabad

17 DNA-Fingerprint17 6. A mélyedések feltöltése Figyelem: A géltasakot nem szabad átszúrni.

18 DNA-Fingerprint18 7. Gél Elektroforézis ( 120 V-tal kb. 30 min) Állítsuk le az elektroforézist amikor a kék sáv a gél vége előtt 1 cm-nél tart.

19 DNA-Fingerprint19 8. A DNS festése •Helyezzük át a gélt a festő edénybe és fedjük fe 60 ml festő oldattal 2 percig. •Öntsük vissza a festő oldatot az Erlenmeyer lombikba.

20 DNA-Fingerprint20 9. A gél kiértékelése CS S1 S2 S3 S4 S5 M Melyik gyanúsított az elkövető?

21 DNA-Fingerprint21 9. Eredmény


Letölteni ppt "DNA-Fingerprint1 A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat. DNA-Fingerprint2 A munkacsoportok kémcsövei."

Hasonló előadás


Google Hirdetések