Molekuláris genetika Falus András.

Az előadások a következő témára: "Molekuláris genetika Falus András."— Előadás másolata:

1 Molekuláris genetika Falus András

2 MIÉRT VAGYUNK KÜLÖNBÖZŐEK?

3 MIÉRT VAGYUNK BETEGEK?

4 TŰT A SZÉNAKAZALBAN!! DE MEKKORA A SZÉNAKAZAL?

5 27

6 Genom méretek /bp/

7 3% 97% pyknonok, fracto, miRNS?

8 GENETIKA REVERZ GENETIKA
Mutáns fenotípus Mutáns allél DNS szekvencia Protein szekvencia REVERZ GENETIKA Protein szekvencia DNS szekvencia Mutáns allél Mutáns fenotípus

9 LEHETŐSÉGEK BETEGSÉGGÉNEK AZONOSÍTÁSÁRA
MÉG NEM AZONOSÍTOTT BETEGSÉGGÉN A pathogenezis biokémiai mechanizmusa ismert Ismert kromoszómán belüli pozíció FUNKCIONÁLIS KLÓNOZÁS POZÍCIONÁLIS KLÓNOZÁS Elképzelés a pathogenezis molekuláris mechanizmusáról vagy rokon mechanizmusú állati vagy emberi betegség KANDIDÁNS(JELÖLT) KLÓNOZÁS

10 Deléciós térképezés gének kromoszómális poziciójának meghatározására

11 A genom szek- 2003 vencia ismert A teljes genom %-ában 1980 1985
o 1980 A teljes genom %-ában 100 1980 1985 Funkcionális Human Genome Project kezdete 1990 Pozício- nális 1995 Jelölt Az emberi gének 80%-a feltérképezve 2000 Pozícionális jelölt A genom szek- vencia ismert 2003 2005

12

13

14 Szekvenciák: DNS RNS fehérje
DNS szekvenálás „könnyű” RNS és fehérje szekvenciák a DNS alapján komputerrel meghatározhatók Fehérje 3D szerkezete? Biológiai funkciója? Hogyan működik az egész a többi fehérjével kölcsönhatásban?

15 Hatalmas szakadék volt az elméleti tudás (modellek)
és a gyakorlati genetikai vizsgálatok között Nem állt megfelelő módszer rendelkezésre Áttörés—technológiai— endonukleázok vektorok

16

17

18 Az elvi lehetőség létrejött: ettől kezdve bármely gén, génszakasz
klónozható volt

19 A REKOMBINÁNS DNS FELHASZNÁLÁSA
szekvencia bankok DNS próbák expressziós vektorok gén terápiás vektorok

20

21

22 DNS komplementaritás (bázis párosodás)

23 DNS DENATURÁLÁS ÉS HIBRIDIZÁLÁS

24 A PRÓBÁK: Egyszálú jelölt oligonukleotidok (genomiális
vagy cDNS szekvenciák vagy RNS), amelyek a komplementaritás alapján hibridizálnak a DNS szállal Segítségükkel egy keresett szekvencia vagy in situ (sejtben, kromoszómán) vagy gélben mutatható ki

25

26

27

28 Southern blot (DNS) I.

29 Southern blot (DNS) II.

30 RFLP ANALÍZIS RFLP=restrikciós fragment hossz-polimorfizmus

31 Restrikciós térkép készítése

32 DNA „ujjlenyomat”

33

34 VNTR alkalmazása (egyedi azonosítás)

35 Polimeráz láncreakció

36 Automatizált DNS szekvenálás

37 AZ AUTOMATIZÁLT SZEKVENÁLÁS EREDMÉNYE
Elektroforézis iránya

38

39 Genom programok HGP kórokozók haszonállatok és növények
laboratóriumi modell állatok

40 A SZEKVENCIA MÉG NEM ELÉG!!

41

42 Babits Mihály: Messze..messze

43 METTŐL MEDDIG TERJED EGY GÉN, HOL VANNAK A SZABÁLYOZÓ RÉGIÓK,
FONTOS A KÖZPONTOZÁS ÉS A HANGSÚLY!! METTŐL MEDDIG TERJED EGY GÉN, HOL VANNAK A SZABÁLYOZÓ RÉGIÓK, ÉS HOGYAN MŰKÖDNEK??

44 EPIGENETIKA Szekvenciák: DNS RNS fehérje DNS szekvenálás „könnyű”
RNS és fehérje szekvenciák a DNS-é alapján komputerrel meghatározhatók Fehérje 3D szerkezete? Biológiai funkciója? Hogyan működik az egész a többi fehérjével kölcsönhatásban? EPIGENETIKA

45 A PUZZLE NÉHÁNY DARABKÁJA
MÉG HIÁNYZIK!